兜唇石斛多糖提取及脱蛋白工艺研究论文

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1、兜唇石斛多糖提取及脱蛋白工艺研究论文赵俊凌，马洁，李戈，段立胜【摘要】目的研究兜唇石斛多糖提取及脱蛋白的制备工艺。方法采用正交实验设计制备不同提取条件多糖溶液，苯酚-硫酸法测定溶液中多糖含量，光密度差值法测定蛋白含量。结果兜唇石斛多糖提取的最佳条件，提取温度100℃，提取时间2h.freell，醇析浓度为80%，醇析时间30h，多糖脱蛋白的最佳条件，样品/萃取剂(V/V)为4∶1，氯仿/正丁醇(V/V)为4∶1，萃取时间30min。结论不同提取及萃取条件下，兜唇石斛多糖提取及脱蛋白测定结果存在明显差异。【关键词】兜唇石斛;多糖;提取;脱蛋白;正交设计Abstr

2、act：ObjectiveToinvestigatetheoptimumconditionsofextractionanddeproteinizationfrompolysaccharideofDendrobiumdevonianum.MethodsThedifferentconcentrationsofpolysaccharideextractionentaldesign,andthephenolsulfuricacidmethodandUVspectrophotometricmethodinethecontentanddeproteinizationofp

3、olysaccharide.ResultsTheoptimumconditionsofpolysaccharideextractionfromDendrobiumperatureof100℃,extractingtime2hours,volumeofaddingl,precipitationconcentrationofethanol80%,precipitationtimeofethanol30hours,thatofdeproteinization-n-butanol4:1,Chloroform:n-butanol4:1,stirringtime30min

4、utes.ConclusionUnderthedifferentconditionofextractionanddeproteinization,therehassignificantdifferencesonthedeterminationresultsforthecontentofpolysaccharideandproteininDendrobiumdevonianum.Keydevonianum;Polysaccharide;Extraction;Deproteinization;Orthogonaldesign石斛属Dendrobium是兰科中的第二

5、大属，全球共有约一千五百多种，主要分布于亚洲的热带和太平洋岛屿的东亚、东南亚及澳大利亚等地区，我国有76种(74个种，2个变种)主要分布于华南及西南地区。石斛作为一种名贵中药被《本草纲目》收录，在《神农本草经》中也被列为上品，其有养胃生津、滋阴清热、明目的功能,用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕,病后虚热,目暗不明等症状。现代药理研究发现石斛属植物具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗血小板聚集、扩张血管、降低血糖等多种活性1，同时在治疗胃肠道疾病和治疗白内障方面也有很好疗效。兜唇石斛Dendrobiumaphyllum(Rohb.)C.E.Fishcher为市场上流

6、通品种，其药理和化学成分的研究都相对较少，赵永灵2等从兜唇石斛的茎中分离得到3种多糖:AP-1,.freelethyltricetin，阿洛醇，蔗糖和icarisideDZ为首次从该属植物中分离得到;酚类化合物丁香酸、木脂素类化合物丁香脂素为首次从该植物中分离得到。黎英等5发现兜唇石斛的水提物对·OH均有很强的清除作用。本实验对兜唇石斛多糖的提取及脱蛋白纯化工艺进行研究，为兜唇石斛开发利用提供参考。1材料与仪器1.1材料兜唇石斛产地为云南省，由药用植物研究所云南分所王云强助理研究员鉴定。1.2试剂与仪器苯酚、浓硫酸、石油醚、无水乙醇、氯仿、正丁醇、丙酮、乙醚等

7、均为分析纯。旋转蒸发器R-210(瑞士布奇)，TU-1901新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，数显恒温水浴锅HH-4(常州国华电器有限公司)，GZX-9140恒温数显鼓风干燥箱(上海博讯设备有限公司)，METTLERTOLEDO系列分析天平AB135-S，PL203。2方法与结果2.1标准溶液配制6～9精密称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖100.0mg，置100ml容量瓶中，加蒸馏水适量使溶解，稀释至刻度，摇匀。精密吸取10ml置100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，每毫升含葡萄糖0.1mg。2.2检测波长的选择精密吸取标准葡萄糖溶液

8、0.3ml，置于具塞比色管中，加蒸馏水