资源描述：
《标记后转输的凋亡细胞流式细胞术体内示踪方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、标记后转输的凋亡细胞流式细胞术体内示踪方法南方医科大学(JSouthMedUniv)?599?标记后转输的凋亡细胞流式细胞术体内示踪方法汪艳-,高毅t,孙尔维,谢金敏一,张会迎一,陈剑波(南方医科大学珠江医院'普外科,2肾移植科移植免疫研究所.广东广州510282;南方医科大学中心实验室,广东广州510515)摘要:目的探索一种可用于转输凋细胞体内示踪研究的方法.方法首先对分离所得活细胞进行(CFSE)荧光标记,再诱导细胞凋亡.将该细胞经静脉注射入受体后,采用流式细胞术和组织学荧光显微镜观察标记凋亡细胞在不同组织的动态分布.同时进行CF
2、SE标记稳定性观察实验.结果CFSE标记凋亡细胞的阳性率高,荧光强度大,不会迅速衰减和外漏.流式细胞术检测可发现标记凋亡细胞在不同组织的动态分布.结论CFSE标记细胞后诱导凋亡,再经流式细胞术检测组织内细胞分布,必要时辅以组织学检测可以作为一种可靠,高效,经济的凋亡细胞体内示踪研究技术方法.关键词:CFSE;流式细胞术;细胞示踪;凋亡中图分类号:R392.33文献标识码:A文章编号:1673.4254(2006)05.0599—04/nvivotracingoftransferredapoptoticcelllabeledusingCF
3、SE:aflowcytometry-basedassaymethodWANGYan,GAOYi,SUNEr—wei,XIEJin—min,ZHANGHui?ying,CHENJian—boDepartmentofGeneralSurgery,InstituteofTransplantationImmunology,DepartmentofKidneyTransplantation,ZhujiangHospital,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510282,China;CentralLaborat
4、ory,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515,ChinaAbstract:ObjectiveToestablishanassaymethodfordetectingthemigrationoftransferredapoptoticcellsintotherecipientusingflowcytometry.MethodsSpleenlymphocyteswereisolatedandlabeledwithanintracellularaminedye,carboxyfluorescein
5、diacetatesuccinimidylester(CFSE).toallowdiscrimination.Thelabeledcellswereinducedwithdexamethasonetoundergoapoptosisandtransferredintorecipientmiceviatailvenoustransfusion.Flowcytometryandhistologicalexaminationofdifferenttissueswereperformedatdifferenttimepoints.Thestab
6、ilityofCFSElabelingforapoptoticcellswasalsotested.ResultsTheCFSE?labeledapoptoticcellswerehighlyfluorescentwithapositivelabelingrateof(98.0~1.9,%.ThestabilityofCFSE--labelingwastestified,andtheCFSE??labeledapoptoticcellsenteringdifferenttissuesatdifferenttimepointswerede
7、tectedbyflowcytome仃yandverifiedbyhistologicalexamination.ConclusionFlowcytometryusingCFSElabelingisreliable,sensitive,preciseandconvenientforapoptoticcelltracinginvivoandinvitro.Keywords:carboxyfluoresceindiacetatesuccinimidylester;flowcytometry;celltracking;apoptosis凋亡是
8、普遍发生于生物体任何组织细胞的一种基本现象.目前已知,许多正常的生长发育,生理过程以及病理状况都与组织细胞凋亡的发生有密切关系[i-3].对于凋亡现象的实验观察目前常用的方法有:根据凋亡细胞表面细胞膜结构变
