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1、197ChinJClinNeurosci2006,14(2),197~201实验方法骨髓基质干细胞的标记示踪技术及其应用许剑，徐格林，刘新峰[南京大学医学院临床学院（南京军区南京总医院）神经内科210002]关键词干细胞；标记；移植摘要骨髓基质干细胞因具有不断自我更新和向多种细胞分化的能力而备受关注。通过干细胞移植并诱导其向各种受损组织细胞分化，可促进神经组织的再生和修复，为神经系统终末细胞坏死性疾病的治疗带来新思路。目前骨髓基质干细胞移植治疗疾病已在动物模型中取得初步成效。为更深入认识移植细胞实现其修复
2、功能的机制，需要有效的标记方法追踪移植细胞在受主体内的分布、迁移、增殖和分化情况。Brdu，荧光染料（DAPI、PKH26、Dil、hochst33342，CFSE等），荧光蛋白，Y染色体，胶体金，磁性标记，放射性同位素等标记方法是近年来常用的干细胞标记技术，它们将离体或在体干细胞的胞核、胞膜甚至基因组作为标记靶点，在获得高标记效率的同时结合特异的检测手段，实现干细胞的体内示踪。本文对常用干细胞标记的原理、优缺点及应用范围等方面做简要介绍。LabelingTechniquesofMesenchymalSt
3、emCellsXUJian,XUGe-lin,LIUXin-FengDepartmentNeurologyofJinlingHospital,SchoolofMedicine,NanjingUniversity,Nanjing210002,ChinaKEYWORDSstemcell;label;transplantationABSTRACTMesenchymalstemcells(MSCs)arewellknownfortheirself-renewandmulti-differentiationpote
4、ntiality.WiththetransplantationoftheMSCs,severalcentralnervoussystemdiseases(stroke,dementia,etc)arehopefultobetreatedeffectively.Totracethedistribution,migration,proliferationanddifferentiationoftheimplantedMSCs,thereneedeffectivelabelingtechniques.Inthi
5、spaper,themechanisms,advantagesandapplicationsofdifferentlabelingtechniquesforstemcellsdevelopedinrecentyearsareintroduced.中枢神经系统终末细胞坏死性疾病(包括脑卒中、帕抗原标记金森病、痴呆等),因神经细胞的不可再生性，严重影响疾病治疗和患者预后。骨髓基质干细胞（marrowmes-通过免疫组化方法，利用抗体对细胞上的抗原进行enchymalstemcells,MSCs）来源于骨髓的具
6、有多向分化检测，从而对移植细胞进行观察。这类抗原分为内源性抗[1]能力的干细胞，有望通过其移植治疗疾病。为研究骨原（细胞本身固有的）和外源性（人为标记的）抗原。髓干细胞移植疗效，需要对移植细胞在体内的存活、迁内源性抗原指移植细胞在体外移植前未进行标记，移、分布及增殖、分化进行监测。所以为区别供体及受移植到宿主体内后利用供体细胞区别宿主的特异抗原进体细胞，需要有有效的标记方法对这些细胞进行标记。行抗原抗体反应，从而予以识别。如用胎儿心肌细胞移从单纯的免疫组织化学技术到直观简单的荧光标记，再植时，选用只在胎儿
7、心肌细胞内存在，成熟心肌细胞中到可用于活体示踪的MRI成像技术，细胞标记技术经历没有的单克隆抗体（Smoothmuscleactin,SMA）利用免疫[2]了漫长的发展和改良过程。本文对这些标记技术的原组化技术来识别。MSCs表面标记有CD44、CD29、理、优缺点及应用进行探讨。CD54等。但因其特异性较低，因而，主要依靠引入外源性基因进行标记。[文章编号]1008-0678(2006)02-0197-05[中图分类号]Q813Q189[文献标识码]A[作者简介]许剑,女(1981-),江西景德镇人,神
8、经内科专业在读博士,主攻脑血管病机制及治疗研究。[通讯作者]刘新峰198中国临床神经科学2006年第14卷第2期3外源性标记方法是指在细胞移植前人为地在体外培被用于活细胞的示踪。较常用的标记物为（H-TdR）。3养细胞内加入特异性抗原，且宿主不产生该抗原。最具H能放射出低能β射线，具有射程短（7μm）、能量代表性的外源性抗原溴脱氧尿嘧啶核苷低(0.018Mev)、半衰期长(12.5年)的特点，对细胞活（bromodeoxyur
