均匀设计法优化珍珠草中总多酚超声波提取工艺研究论文

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时间:2018-07-09

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1、均匀设计法优化珍珠草中总多酚超声波提取工艺研究论文【摘要】目的为充分利用大戟科珍珠草资源,优选珍珠草有效成分总多酚的提取工艺。方法以总多酚含量考察为指标,使用超声波进行提取,采用均匀设计法对工艺条件进行优化,普鲁士蓝法进行总多酚含量测定。结果总多酚最佳提取工艺:乙醇浓度10%,提取时间90min,液料比为10,超声功率200ethodsThetotalpolyphenolizedbyequalitydesignandthecontentinedbyPrussianbluemethod.ResultsTheoptimumpro

2、cessoftheextractiontechnologye90minutes,theratioofmaterialtoliquid10andultrasonicpoethodissimpleandfeasible,andcanbeusedastheextractionprocessoftotalpolyphenolfromPearlgrass.Keyg置于50ml容量瓶中,30%甲醇水溶解并加至刻度,得到0.5mg/ml的对照品溶液。精密吸取该溶液1ml置于10ml容量瓶中,加入30%甲醇水至刻度,配成50μg/ml对照品

3、溶液。2.1.2供试品溶液的制备取珍珠草提取物0.1g,精密称量,加入40ml30%甲醇水,置水浴中微沸浸提15min后,趁热抽滤,.freell。2.1.3标准曲线的制备精密吸取上述对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml置于25ml容量瓶中,依次加入0.100mol/L三氯化铁溶液0.5ml,0.008mol/L铁氰化钾溶液0.5ml和0.10mol/L盐酸溶液0.5ml,定容,得到不同浓度的对照品溶液。同时在25ml容量瓶中加入0.100mol/L三氯化铁溶液0.5ml、0.008mol/L铁氰化钾溶液0.

4、5ml和0.10mol/L盐酸溶液0.5ml,定容后得到空白溶液。随行空白,在700nm波长处测定吸光度。以对照品的质量浓度为纵坐标,吸光度为横坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程C=2.1061A-0.0612,相关系数r=0.9992,结果表明没食子酸在0.4~2.0μg/ml时,质量浓度与吸光度呈良好的线性关系。2.1.4精密度实验取1份样品按上述方法制备成供试品溶液,于0,1,2,3,4h分别测定,每个样品测定3次的平均吸光度值RSD为1.41%。2.1.5稳定性实验取同一份供试品溶液测定吸光度,结果测定5次的平均RS

5、D为0.55%。2.1.6重现性实验取同一批样品,精密称取5份,测定吸光度并计算多酚的质量分数,结果吸光度值RSD为2.21%(n=5)。2.1.7回收率计算采用加样回收法。精密称取珍珠草提取物0.1g,加入0.5mg/ml对照品溶液3ml,按上述样品制备和测定方法测定吸光度,并计算总多酚,结果平均加样回收率为98.7%,吸光度值RSD为2.85%(n=5)。2.2提取条件2.2.1工艺流程珍珠草干品→粉碎(过40目筛)→称量→装料→加盖浸泡→超声波提取→离心过滤→减压浓缩→正丁醇萃取→浓缩干燥→提取物。2.2.2实验安排采

6、用均匀设计法考察4个因素即乙醇浓度(X1)、提取时间(X2)、液料比(X3)和提取功率(X4)对珍珠草中总多酚提取率的影响。均匀实验之前,已经进行了单因素实验,在此基础上,为获得最佳工艺条件,针对以上条件做4因素7水平的均匀实验。研究因素及其水平见表1。表1因素与水平U7(74),D=0.47602.3总多酚含量的测定称取干燥(过40目)珍珠草5.0g,按均匀试验表所列条件,进行超声波提取。减压抽滤,蒸干,用30%甲醇定容于25ml容量瓶中,量取5ml样品,依“2.1.1”项下的方法测定吸光度,并换算成提取率,提取率计算:提

7、取率(%)=(溶出成分质量/干料质量)×100%。结果见表2。表2实验安排与结果2.4回归分析利用计算机进行多元线性回归处理,得多元线形回归方程:Y=5.56-1.64×10-2X1+4.00×10-3X2-5.71×10-3X3-1.67×10-2X4,R=0.9994F=29.93F0.05(4,2)=19.25,所以方程有显著的线形关系。方差分析结果见表3。表3方差分析从上式多元回归中标准偏差回归系数可以看出,超声提取的影响效应为溶剂的用量最大,超声时间次之,超声功率最小。因为液固比太小溶液很快达到溶解饱和不利于收率的

8、提高,液固比过大对收率没有多大影响,但溶剂量会大大增加;超声时间不够时,只有一部分细胞壁和纤维组织破坏了,大部分多酚类物质只能慢慢地渗透出来,但是超声时间过长能量消耗太大;功率太低时无法破坏珍珠草的细胞壁和纤维组织,而功率过高时也是能耗太大不可取。所以根据回归方程和实际经验,选择最佳的超声

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