胃癌癌周微淋巴管与淋巴道转移的关系及其意义

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1、胃癌癌周微淋巴管与淋巴道转移的关系及其意义【摘要】  目的探讨胃癌癌周微淋巴管与淋巴道转移的关系及其与临床病理特征之间的关系。方法采用微淋巴管特异标记物Podoplanin标记微淋巴管,用Ki67检测微淋巴管内皮细胞的增殖活性,在一张切片上同时测定56例胃癌组织微淋巴管密度及其增殖活性,并结合胃癌临床病理特征进行分析。结果胃癌癌周微淋巴管密度与肿瘤的分化程度、淋巴结转移以及淋巴管受累有关(F=14.96,t=4.51、4.11;P<0.05、0.01)。胃癌癌周微淋巴管内皮细胞Ki67指数仅与淋巴管受累有关系

2、(t=3.73,P<0.01)。结论胃癌癌周微淋巴管可能促进肿瘤淋巴道转移;胃癌癌周微淋巴管密度是评价其分化程度、淋巴结转移及淋巴管受累的有价值的指标。【关键词】胃肿瘤淋巴转移淋巴管生成肾小球足突细胞膜黏蛋白  [ABSTRACT]ObjectiveToinvestigatetherelationshipbeticrolymphvesselsandlymphaticmetastasisingastriccarcinoma.MethodsThelymphaticmicrovesseldensity(LMVD)in

3、cancersurroundingareamunohistochemistry,usingmonoclonalantibodyforPodoplanin.TheKi67expressionofthelymphaticliningcellsetimebydoublelabelingimmunohistochemistry.Therelationshipbetphaticinvolvement,andlymphnodemetastasis(F=14.96;t=4.51,4.11;P<0.05,0.01).The

4、Ki67labelingindexofthelymphaticliningcellscorrelatedonlyphaticinvolvement(t=3.73,P<0.01).ConclusionThemicrolymphaticvesselsmaypromotelymphaticmetastasis,theirdensityisofvalueinassessingthedifferentiation,lymphnodemetastasisandlymphaticinvolvementofthecancer

5、.  [KEY分期标准分期,Ⅰ期+Ⅱ期35例,Ⅲ期+Ⅳ期21例。肿瘤直径>4cm者24例,≤4cm者32例。肿瘤浸润深度累及黏膜及黏膜下层者6例,累及肌层者18例,累及浆膜及浆膜外者32例。早期胃癌6例,中晚期胃癌50例。伴有淋巴结转移者27例,无淋巴结转移者29例。所有蜡块均行连续切片,厚度为5μm。  1.2胃癌癌周、癌内微淋巴管密度(LMVD)及微淋巴管内皮细胞Ki67指数的检测  用免疫组织化学双重染色方法。一抗分别为淋巴管内皮细胞特异性标记物Podoplanin和检测细胞增殖状态的抗体Ki67,分别购自A

6、ngiobio公司和北京中杉试剂公司。HistastainTMDS双染试剂盒购自Zymed公司。染色步骤如下:切片脱蜡,梯度乙醇水化,使用过氧化氢灭活内源性过氧化物酶,微波修复抗原,血清封闭,加一抗(Podoplanin,工作浓度为1∶200),加生物素化二抗,加辣根过氧化物酶标记链霉卵白素,用DAB显色,显微镜下监控,蒸馏水终止反应。加双染增强剂,再次微波修复抗原,血清封闭,加第二种一抗(Ki67,工作浓度为1∶100),加生物素化二抗,加辣根过氧化物酶标记链霉卵白素,用AEC显色,显微镜下监控,自来水终止反应,

7、苏木精复染,使用水溶性封片剂Clearmount封片。以结肠癌切片作为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。  1.3结果判定  以阳性着色的单个内皮细胞或内皮细胞簇计为一个阳性微淋巴管,参照VD计数:首先在低倍镜下先选取阳性染色微淋巴管最密集区即“热点”,然后在200倍视野下计数LMVD,每例计数3个视野,最后求其均值。参考VD为11.89±3.95;癌内微淋巴管数目少,多为闭锁的条索状,或呈狭长的裂隙状,其LMVD为5.83±3.26,癌周与癌内LMVD比较,差异有显著性(t=10.1,P<0.01)。有淋

8、巴结转移的胃癌切片微淋巴管内可见癌栓,1例无淋巴结转移的胃癌切片微淋巴管内也发现癌栓。  2.2胃癌癌内及癌周LMVD、微淋巴管内皮细胞Ki67指数与临床病理特征之间的关系  胃癌癌内LMVD在高、中、低分化胃癌分别为2.25±0.82、4.12±2.32及7.75±2.71,其中癌内的LMVD与肿瘤的分化程度有关(F=20.7

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