淋巴管侵犯与鼻咽癌患者淋巴结转移的关系

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1、淋巴管侵犯与鼻咽癌患者淋巴结转移的关系邓恋，刘陶文，屈元姣，曹轶林，陈熙，彭丽芳(541002广西桂林，广西壮族自治区南溪山医院暨桂林医学院附属南溪山医院肿瘤科)[摘要]目的探讨鼻咽癌组织中淋巴管侵犯（LVI)与淋巴结转移之间的关系。方法用单克隆抗体D2-40及CKpan免疫组化染色检测66例鼻咽癌患者蜡块组织标本的LVI阳性率及淋巴管密度，分析LVI与LVD、淋巴结转移及临床病理特征之间的关系。结果66例NPC组织的瘤周LVD明显高于瘤内LVD，差异有显著性意义（P＜0.01）；其中LVI阳性率为63.6%（42/66），LVI与瘤周L

2、VD呈正相关（P＜0.05），与瘤内LVD无明显关系（P＞0.05）；淋巴结转移组LVI阳性率高于未转移组，差异有显著性意义（P＜0.01）；LVI预测NPC淋巴结转移的敏感性为74.5%;特异性为90.9%;阳性预测值为97.8%;阴性预测值为58.3%。LVI阳性率与N分期呈正相关，且与T分期及临床分期有关（P＜0.05），而与年龄、性别及肿瘤远处转移无关（P＞0.05）。结论LVI可作为判断NPC发生颈部淋巴结转移的重要参考指标。[关键词]D2-40；鼻咽癌；淋巴管侵犯；淋巴管密度；淋巴结转移[中图法分类号]R739.62;R73-

3、37;R730.23[文献标志码]A[基金项目]广西科学研究与技术开发计划项目（桂科攻0322025-4）；桂林市科学研究与技术开发计划项目（20080403）.[通信作者]刘陶文，E-mail:liu80838689@126.com.鼻咽癌（nasopharyngealcarcinoma，NPC）是常见的头颈部恶性肿瘤之一，早期易出现颈部淋巴结转移及远处转移[1]。肿瘤细胞侵犯淋巴管又称淋巴管侵犯（lymphovascularinvasion，LVI)，淋巴管密度（lymphaticvesseldensity，LVD)是评估肿瘤淋巴管生

4、成的重要指标。近年来，在非小细胞肺癌、乳腺癌及恶性黑色素瘤等研究中发现肿瘤组织中淋巴管的侵犯与淋巴结转移及其预后有关[2-4]。但是，关于鼻咽癌组织中淋巴管侵犯与淋巴结转移关系的尚不清楚，对于淋巴管内的细胞或细胞团是否为肿瘤细胞也未行鉴别。本研究应用单克隆抗体D2-40及细胞角蛋白（广谱）（CKpan）分别对鼻咽癌蜡块组织标本中的淋巴管及肿瘤细胞进行免疫组织化学染色，以探讨LVI与患者临床病理特征，尤其是淋巴结转移间的关系。1材料与方法1.1标本及临床资料标本收集：2011年10月至2012年10月期间入住广西壮族自治区南溪山医院肿瘤科，

5、并由该院病理科确诊为鼻咽癌患者的存档蜡块标本66例，均为低分化鳞状细胞癌，具有完整的相关临床资料及病理资料；患者均为初治且取组织标本前未接受放化疗；排除存在明显炎症、坏死及严重出血的组织标本。其中男51例，女15例，年龄19～77岁，中位年龄48.5岁。按照我国鼻咽癌2008分期[5]（福州2008分期）标准分期：I期1例，II期6例，III期26例，IVa期27例，IVb期6例，其中T1期2例，T2期11例，T3期31例，T4期22例，N0期11例，N1a期6例，N1b期12例,N2期22例，N3期15例，M0期60例，M1期6例。1.

6、2试剂及免疫组化方法即用型免疫组化EliVisionTMsuper试剂盒（鼠/兔）、即用型D2-40鼠抗人单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白（广谱）免疫组化单克隆抗体及DAB显色试剂盒均购自于福州迈新生物技术开发有限公司。石蜡标本经2μm连续切片，采用免疫组化Elivison二步法，严格按照说明书进行染色。阴性对照组用PBS液代替一抗，以已知阳性反应片作阳性对照。1.3结果判断D2-40免疫组化染色以细胞胞浆或包膜呈黄色或棕黄色颗粒为染色阳性，LVD采用Weidner等[6]报道的方法，以D2-40染色阳性的单层扁平上皮且管腔内无红细胞聚集的脉

7、管视为淋巴管，D2-40染色阳性的单个内皮细胞或内皮细胞簇同样视为1个淋巴管。瘤周区域为癌细胞团块周围2mm范围以内的组织区域。先在低倍镜下（×10）分别找到瘤内及瘤周区域阳性脉管的集中区，即“热点”，再在高倍镜下（200×）计数3个视野的淋巴管数量，然后取均值即为LVD。CKpan免疫组化染色以细胞胞浆内呈棕黄色颗粒染色为阳性染色，结合细胞的形态、大小及位置判定是否为肿瘤细胞。LVI的判定：D2-40染色阳性的淋巴管管腔内存在细胞聚集，且管腔内的细胞经CKpan染色为阳性，即判定为LVI。1.4统计学方法计量资料以x±s表达，应用SPS

8、S16.0统计软件，计量资料采用t检验；计数资料采用χ2检验或Fisher’sExact检验；计数资料的多个独立样本间的比较采用KruskalWallisH检验；采用spearman等级相关分