胃癌中微淋巴管密度检测的意义

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1、胃癌中微淋巴管密度检测的意义【摘要】目的利用淋巴管内皮生长因子受体3(VEGFR3)检测胃癌组织内微淋巴管密度(MLD)，研究其与增殖期细胞核抗原(PA)及临床因素之间的相关性。方法采用免疫组化法，以VEGFR3(又称FLT4)为标记物，检测60例胃癌淋巴结转移组织内MLD与增殖期细胞核抗原(PA)蛋白及临床病理因素之间的相关性。结果胃癌淋巴结转移组织VEGFR3阳性率和MLD明显增高;胃癌组织中MLD与PA之间呈正相关。结论VEGFR3可促进肿瘤微淋巴管生成,VEGFR3和MLD的表达可能与胃癌的淋巴结转

2、移相关。【关键词】胃癌;淋巴管内皮生长因子受体3;微淋巴密度　　ABSTRACT：ObjectiveTodetectthelymphaticmicrovesseldensity(MLD)ingastriccancerbylymphaticendothelialgroarkertodetecttheexpressionofMLDandPAproteinin60casesofgastriccancertissuesbyimmunohistochemicalmethod.ResultsThepositiverateofVEG

3、FR3andMLDphnodemetastasis,andthereightpromotemicrotumorlymphangiogenesis,andVEGFR3andtheexpressionofMLDmayberelatedtolymphnodemetastasisofgastriccancer.　　KEYLD)的表达并探讨其与增殖期细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen，PA)及临床病理因素之间的相关性。　　1材料与方法　　1.1标本来源　　选择1999～2002年在咸

4、宁学院附属第一医院手术切除的胃癌标本共60例，并取距离癌组织>5cm的正常组织作对照。患者中男48例，女12例，年龄32～76岁，平均58岁。标本均经10%的中性福尔马林固定，常规石蜡包埋。　　1.2实验试剂与材料　　兔抗人VEGFR3多克隆抗体、小鼠抗人PA单克隆抗体、即用型链酶亲合素生物素过氧化物酶复合物试剂盒。试剂盒组成(福州迈新公司)：A：内源性过氧化酶阻断剂(无色)，B：动物非免疫血清(羊，蓝色)，C：生物素标记的羊抗鼠/兔IgG(黄色)，D：链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶(红色)。试剂盒不含酶底

5、物显色剂及复染剂。　　1.3方法　　按试剂盒说明书方法操作。　　1.4结果判断　　VEGFR3蛋白主要表达于胃癌细胞及正常胃黏膜上皮细胞的胞质和(或)细胞膜上。测微淋巴管密度(MLD),先在低倍镜(SP×200)视野下观察，选择VEGFR3阳性细胞最多的3个视野,然后分别在高倍镜(SP×400)视野下计数。染色的单个游离内皮细胞(排除肿瘤细胞或其他基质细胞)计为1条微淋巴管，成簇状相连或形成管状结构的细胞团计为1条微淋巴管，有血管平滑肌的管状结构不计入内。取其中计数最多的1个高倍镜视野内的微淋巴管数作为该组织的ML

6、D。　　PA采用免疫反应半定量评分[3]。按染色强度评分:0分为无染色,1分为染色较弱(浅黄色),2分为中等强度染色(棕黄色),3分为强染色(棕褐色)。按染色细胞的百分比评分:0分为无阳性细胞,1分为染色细胞<10%,2分为染色细胞在11%～50%之间,3分为染色细胞在51%～80%之间,4分为染色细胞>80%。两种评分相乘即得出免疫反应评分,范围在0～12分之间。　　1.5统计学处理　　对MLD、PA行KolmogorovSmirnovZ检验。不符合正态分布，故用中位数(四分位间距)表示，采用Mann

7、an等级相关及单因素Logistic回归分析，给出OR值(95%可信区间)。所有统计采用SPSS10.0软件进行计算。　　2结果　　2.1胃癌和正常组织中MLD检测　　通过免疫组化法染色,检测到胃癌和胃正常组织中MLD分别为6(4.00～8.00)和3(2.00～5.75)，胃癌组织中MLD明显增高(U=201.5，P=0.01)。(图1，2)图1胃癌中MLD的阳性表达(SP×200)图2胃癌中VEGFR3的阳性表达(SP×400)　　2.2胃癌组织中MLD与PA之间的相关性MLD与PA之间有相关性(r=0.26，P

8、<0.05)。　　2.3胃癌组织中MLD与临床病理因素之间的相关性　　胃癌组织中MLD与患者淋巴结转移状况有相关性(r=0.33,P<0.05),与其他临床病理因素之间无相关性,见表1。表1胃癌组织中MLD与临床病理因素之间的相关性　　2.4胃癌组织中MLD对淋巴结转移影响的单因素Logistic回归分析　　按中位数将