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时间:2018-07-07
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1、一起溶藻弧菌引起食物中毒【摘要】2002年9月在南京市雨花台区发生了一起因食用超市销售的卤菜而引起的23例患者食物中毒事件,本实验室按国家标准从流行病学,实验室检验,小白鼠毒力试验证实是由溶藻弧菌引起的。【关键词】溶藻弧菌;食物中毒溶藻弧菌是海水中常见的一类弧菌,以前被认为是副溶血弧菌的生物型[1],1974年《伯杰氏细菌鉴定手册》中将它列为副溶血弧菌Ⅱ型,后证实两者的DNA中G+C含量不同,1984版把它从副溶血弧菌中划分出来,成为一个独立的种[2]。溶藻弧菌在食品中特别是海产品中的数量远比副溶血弧菌为多,它的检出以前被认为与食物中毒无关[3]。溶藻弧菌可经创面感染人体引起蜂窝组织
2、炎,游泳者中耳炎,甚至引起败血症等肠道外感染。近年由溶藻弧菌污染食品引起的中毒频繁报道:嘉兴市郊区[4]、济南市污染的凉拌海带丝[5]、我市溧水县[6]。因此,由溶藻弧菌引起的肠道感染越来越得到实验室的重视。2002年9月在我区梅山一大型超市也发生了一起因溶藻弧菌污染卤菜而引起的食物中毒。现将调查结果报告如下:1流行病学调查81.1中毒经过2002年9月12日,梅山某医院从晚上7时至13日上午陆续收治了33例急性腹泻患者,其中女8例,男23例,2例为儿童,患者出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻、水样便等急性胃肠炎症状,腹痛多为下腹或脐部阵发性绞痛,少数人有发热高达38℃以上,有头痛头晕症状,
3、潜伏期最短6h,最长12h,经补充电解质,抗生素对症治疗,效果良好,于9月13日中午全部出院。1.2现场调查雨花台区疾病预防控制中心于2002年9月13日上午接报赴梅山进行采样,问询调查。据患者称,均有食用某大型超市出售的A品牌盐水鸭、酱鸭、盐�鸡等卤菜。我实验室立即赶赴超市采样,共采A、B两个品牌卤菜各6份。超市工作人员穿白大褂,戴口罩,一次性手套,符合有关规定,柜台面对顾客一面有一面大玻璃遮挡。A、B两品牌卤菜分别由工人销售,切、售分开。2实验室检验2.1样品采集采集患者提供的剩余食物样A品牌酱鸭(200g)、盐水鸭(250g)、盐�鸡(400g),B品牌烤鸭(200g)。采集9
4、月13日在售柜台卤菜A品牌酱鸭、盐水鸭,凤爪等6份,B品牌酱鸭、烤鸭等(9月13日生产)6份。患者提供的未用药呕吐物2份,未用药前水样便未采到。但根据文献[7]8报道采集8份用药后水样便,尚有7份检出,其检出率为87.5%。本实验室将在以后的检验中加以验证。另二名患者发病期、恢复期血清,营业员肛拭子3份、砧板、切菜刀擦拭子各2份。2.2检验方法对采集的标本按国家标准[8]检测菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、其它嗜盐弧菌。培养基、血清、小白鼠、生化反应管均由江苏省疾病预防控制中心培养基厂提供,培养基按国家标准[8]配制。2.
5、3实验结果对剩余食物样4份,其它食品样12份,肛试子3份,擦拭子4份,呕吐物2份,均采用增菌后分离和直按分离两种分离方法,在患者提供的品牌A卤菜(酱鸭、盐水鸭、盐�鸡)、患者呕吐物2份中检出形态、菌落特征、生物学性状均相同的溶藻弧菌5株,其它样均未检出本菌,所有样均未检出其他致病菌。患者提供的剩余食物样菌落总数均达10�6个/g多,大肠菌群均≥24000mPN/100g,与样品隔夜放置有关系。在9月13日采样的12份卤菜中菌落总数也有10�5个/g及以上之多,大肠菌群均在150以上。病原株表现如下:2.3.1形态特征革兰染色阴性、微弯曲短杆菌、有两端浓染,用压片法可看出有动力,无荚膜
6、。2.3.2培养特性8在SS琼脂平板上生长不良、半透明、细小、不发酵乳糖,分区划线接种仅在N01区有少量菌生长。在嗜盐性琼脂平板上,直接分离时优势明显,长势不错、菌落大,2~3mm灰白色,光滑、湿润、边缘不整齐,有点似蜡滴状。在TCBS平板上,菌落大,2~3mm,湿润、光滑、产生明显色素,黄色、分解蔗糖,在血平板上有溶血,灰白色。2.3.3生化试验结果将经双糖铁纯培养的菌落进行接种生化反应管,一系列结果如下:阳性或生长的有:氧化酶(试纸法)、靛基质、蔗糖、甘露醇、葡萄糖产酸、动力、甘露糖、麦芽糖、硝酸盐还原、枸橼酸盐、果糖、V-P、赖氨酸脱羧酶试验。阴性或不生长的有:鸟氨酸脱羧酶、乳
7、糖、阿拉伯糖、尿素、气体、H�2S、苯丙氨酸、葡萄糖产气、β-半乳糖苷、鼠李糖、山梨醇、木糖、棉子糖。重要的耐盐试验溶藻弧菌在无盐胨水和11%氯化钠胨水不生长,在3%~10%氯化钠胨水中生长良好,属于在嗜盐弧菌中较耐盐的。其与副溶血弧菌的重要区别是副溶血弧菌在10%氯化钠胨水中不生长。2.3.4小白鼠毒力试验在市疾病预防控制中心微生物实验室的协助下,参照GB4789.7-94进行[9]购买了10只(18~20g)的小白鼠。将分离出的4株溶藻弧菌无菌转种于1
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