桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠糖代谢机理的实验研究论文

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1、桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠糖代谢机理的实验研究论文李天洙，李香俊，金香子，张学武【摘要】目的通过观察桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠的体质量、饮水量，空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)等生化指标及对葡萄糖激酶(GK)表达的影响，初步探讨桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠糖代谢的机理。方法选用成年雄性豚鼠48只，每组8只：正常组，桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组.freela公司)，蛋白质提取纯化试剂盒(Biossp1250)，GK单克隆抗体(SantaCruz,USA);其他试剂均应用国产优级纯试剂。1.4仪器全自动生化分析仪(日立7600)，糖化血红蛋白分析仪(SysmexGT)，电泳

2、装置(Bio-rad)。2方法2.1制作糖尿病动物模型实验动物适应性喂养1周后,禁食不禁水12h,一次性腹腔注射STZ80mg/kg(临用前用pH4.5的柠檬酸缓冲液溶解,配成浓度为1%混合液,30min内注射完),第7天禁食不禁水12h,用乙醚麻醉后取眦静脉血,离心后取血清测FBG,取FBG≥8.83mmol/L者作为糖尿病成模标准2。2.2实验分组及药物处理取造模成功的糖尿病豚鼠48只(本实验造模成功54只)，按血糖和体质量随机分为阴性对照组(模型组)、桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组及阳性对照组(盐酸二甲双胍治疗组)，每组各8只，桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组分别灌胃

3、桦褐孔菌提取物300，600，900mg/kg。阳性对照组灌胃盐酸二甲双胍200mg/kg，正常对照组和糖尿病模型组每天灌胃相同剂量的蒸馏水1次,连续8周。实验期间饲以标准饲料、自由饮水及新鲜蔬菜。2.3实验观察及生化指标测量监测各组饮水量，每天测量饮水量，每隔7d测量体质量。实验8周后，各组禁食不禁水12h，麻醉后心脏取血测量生化指标(FBG，HbA1c)。2.4in/次。压片后加入ECL显色液，置于UVP图像成像仪中观察并分析结果。条件设置为曝光1，2，4min，CCD自动获取图像。以β-actin作为内参对照。2.5统计分析数据以±s表示，实验前后数据比较采用t检验，各组间进行

4、单因素方差分析。实验数据处理均用SPSS16.0统计软件进行统计分析。3结果3.1实验组饮水量和体质量的变化实验前后相比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大、中剂量组的饮水量均显著减少(P0.01);实验后，与阴性对照组比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大、中剂量组的饮水量显著减少(P0.01)，并表现为浓度梯度依赖性;实验后，桦褐孔菌提取物大、中剂量组的饮水量和阳性对照组饮水量比较无显著性差异，实验后，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的体质量与阴性对照组比较体质量增加明显(P0.05)。结果见表1。表1各实验组实验前后饮水量及体质量的比较与实验后饮水量及体质量的比较3.2各实验组FBG

5、和HbA1c的变化实验前后相比较，阳性对照组的FBG水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物大、中剂量组的FBG均明显下降(P0.05);实验后与阴性对照组比较，阳性对照组的FBG水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物大、中剂量组的FBG均明显下降(P0.05);实验后与阴性对照组比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大、中剂量组的HbA1c均明显下降(P0.05)，并表现出浓度梯度依赖性，阳性对照组与桦褐孔菌提取物大、中剂量组的HbA1c水平比较无显著变化，结果见表2。表2各实验组实验前后FBG及HbA1c的比较与实验后FBG及HbA1c的比较3.3各实验组GK表达的变化实验后，各

6、实验组GK表达情况见图1，桦褐孔菌低剂量组和阴性对照组与正常组比较GK表达无明显变化，桦褐孔菌中、高剂量组与阴性对照组比较，GK表达显著增高，桦褐孔菌对GK表达的影响表现浓度梯度依赖性。阳性对照组的GK表达略有增高，但不及桦褐孔菌高剂量组的GK表达。图1桦褐孔菌对GK表达的影响4讨论糖尿病是一种内分泌紊乱引起的代谢性疾病。近年来，糖尿病的发病率日趋增加，其并发症引起的死亡率继心脑血管疾病、癌症之后居第3位。目前，已被证实的中药的降糖机制有:起胰岛素样作用或修复胰岛作用、促进糖有氧氧化和脂肪组织摄取糖、提高耐糖能力，增加肝糖原含量，抑制糖原分解，葡萄糖潜酶抑制作用、提高胰岛素敏感性、改

7、善血液流变性、醛糖还原酶抑制作用、蛋白质非酶糖基化抑制作用等3。本实验利用豚鼠制作STZ糖尿病模型，基于STZ具有能够直接破坏胰岛细胞导致胰岛功能衰竭，对其他组织毒性相对较少，实验动物存活率高的特点，并且，豚鼠和其他啮齿类动物比较，具有对药物非常敏感的特点。本实验结果表明桦褐孔菌中、高剂量组的饮水量、FBG、HbA1c明显减少，体质量明显增加，并且具有浓度梯度依赖性，提示桦褐孔菌提取物对糖尿病豚鼠的糖尿病症状有较好的治疗作用,这些内容和陈艳秋、张香花等4，