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时间:2018-07-07
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1、口腔鳞癌中IL8的表达及其与微血管生成的关系论文周健,徐文华,陈乔尔,王元银,王银龙,何家才【摘要】目的探讨白细胞介素8(IL8)的表达与口腔鳞癌(OSCC)血管形成和生物学行为的关系及意义。方法应用免疫组织化学技术检测55例OSCC手术切除标本和10例正常口腔粘膜标本中IL8的表达及肿瘤内的微血管密度(iMVD)。结果口腔鳞癌标本中32例(58.18%)IL8呈阳性表达,口腔鳞癌微血管密度为38.58±12.43;IL8评分为高级的口腔鳞癌组织iMVD高于IL8评分为阴性和低级的口腔鳞癌组织。
2、iMVD与IL8呈正相关(rs=0.699,P0.01)。结论IL8表达与肿瘤内iMVD明显相关.freelanOralSouamousCellCarcinomaKeymunohistochemistry近几年来,白细胞介素8(interleukin8,IL8)作为一种新发现的影响肿瘤微血管生成的有效指标已被用于多种人类肿瘤的研究[1,2],但其在口腔鳞癌中的表达及临床病理学意义的研究较少。我们利用免疫组织化学方法观察口腔鳞癌癌组织中IL8的表达及其与微血管生成的关系。1资料和方法1.1资料55例口
3、腔鳞癌标本取自2000年2月~2005年2月间安徽医科大学第一附属医院和附属口腔医院住院患者。男35例,女20例。年龄29~68岁,平均47.51±8.10岁。其中颊12例,舌25例,口底6例,牙龈7例,上腭3例,磨牙后区2例。所有标本均为手术切除标本,术前未经放、化疗,术后均经病理证实。按国际抗癌联盟(UICC)1992年临床分期标准:Ⅰ期12例,Ⅱ期21例,Ⅲ期17例,Ⅳ期5例。按OSCC病理分级:高分化25例,中分化17例,低分化13例。10例正常口腔粘膜标本取自我院门诊口腔良性疾病患者,经病理学检查证
4、实。1.2试剂来源IL8抗体为兔抗人单克隆抗体,购于武汉市博士德生物技术公司。CD34鼠抗人单克隆抗体、链霉卵白素过氧化酶(SP)试剂盒和DAB试剂盒均购于福州迈新生物技术开发公司。1.3IL8表达的测定采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连接(SP)免疫组织化学方法。以IL8单抗作为第一抗体,操作参照试剂说明书进行。于免疫染色最多的区域计数1000个鳞癌细胞,计算阳性细胞百分数和染色强度。染色强度:0为阴性,1为弱阳性,2为阳性,3为强阳性;阳性细胞百分数:0为0,1为25%,2为25%~50%,3为5
5、0%;染色强度与阳性细胞百分数和2即为免疫组化阳性。IL8评分分级:0~2为阴性,3~4为低级,5~6为高级。1.4微血管密度(iMVD)的测定应用抗CD34单抗步骤同上。计数方法参照Yuan等的评判标准[3]:与毗邻微血管、肿瘤细胞、其他结缔组织不相连的任何褐色组化染色的内皮细胞均作为一条独立的微血管,有平滑肌包绕的大血管除外。每一标本在低倍镜(×100)下选3个微血管数最多的区域即“热点”,在每一个区域中计数一个高倍镜(×400)下的微血管数,取3个视野的均值。1.5实验对照以试剂盒中随赠的阳性切片作阳
6、性对照,用PBS代替一抗作阴性对照1.6统计学方法采用SPSS11.0统计软件包作统计分析。计数资料采用χ2检验,计量资料两组间比较选择两样本t检验,多组间比较选择方差分析,相关分析采用spearman等级相关分析。2结果2.1IL8表达及其与各临床病理指标间的关系55例口腔鳞癌标本中IL8染色阳性为32例(58.18%),正常组织中其表达为阴性。IL8主要表达于鳞癌细胞胞浆和胞核,呈棕褐色。偶见于浸润的炎症细胞,而基质细胞呈阴性染色,见图1。经χ2检验,IL8表达与口腔鳞癌患者年龄、性别、肿瘤大小无
7、关,而与病理分级、临床分期及淋巴结转移关系密切,见表1。2.2口腔鳞癌中iMVD及其与各临床病理指标间的关系所有口腔鳞癌以CD34标记的iMVD为38.58±12.43,正常组织的iMVD为10.37±4.65。CD34表达主要位于血管内皮细胞,呈棕褐色,见图2。癌区组织中微血管形态不规则,分布不均,微血管最多的区域位于癌巢的周边部呈簇状,部分呈发芽状。正常口腔粘膜组织中分布较少而均匀。经统计分析,口腔鳞癌的iMVD较正常组织有显著性增高(P0.05)。口腔鳞癌的iMVD与口腔鳞癌患者年龄、性别、肿瘤大小无关
8、,而与病理分级、临床分期及淋巴结转移关系密切,见表2。表1口腔鳞癌中IL8表达与各临床病理指标之间的关系注:χ2检验,*为三组间比较,P0.05;**为高分化与低分化间比较,P0.05表2口腔鳞癌中iMVD与各临床病理指标之间的关系2.3IL8表达与iMVD的相互关系IL8为高级(评分5~6分)时,鳞癌组织iMVD(49.56±10.09)明显高于IL8为阴性(评分0~2分)的鳞癌组织(30
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