midkine在食管鳞癌中的表达及其与微血管密度的关系

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1、Midkine在食管鳞癌中的表达及其与微血管密度的关系作者:王琼,赵永年,刘钧,朱治键【摘要】  目的研究MK在食管鳞癌中的表达及与肿瘤血管形成的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测45例食管鳞癌组织中MK的表达,同时以CD34标记微血管内皮细胞测定微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果45例食管鳞癌组织中MK阳性表达率为77.8%,MK阳性的食管鳞癌组织MVD为40.43±6.27,MK阴性的食管鳞癌组织MVD为31.34±3.89,两者有显著性差异(P<0.01)。结论MK在食管鳞癌中高表

2、达并与血管形成有关。【关键词】食管癌 MK 血管生成  ExpressionandSignificanceofMidkine(MK)inEsophagealSquamousCellCarcinomaandCorrelationidkineinesophagealsquamouscellcarcinomaandtherelationtoangiogenesis.MethodsAImmunohistochemicalSPtechniqueesophagealsquamouscellcarcinoma,Microvessel

3、density(MVD)inedinendothelialasCD34.ResultsPositiveMKImmunostaininga,MVDapositiveforMKanegativeforMK(P<0.01).ConclusionOverexpressionofMkinesophagealcarcinoma,andcorrelationa.  Keya;Midkine;Angiogenesis  0引言  近年来,有报道Midkine(MK)对肿瘤新生血管生成具有明显的调控作用[1]。在国内,MK与食管鳞癌血管

4、生成的有关报道较少。我们在对贲门癌血管生成及食管癌MK观察的基础上[2,3],应用免疫组化方法检测45例食管鳞癌组织中MK表达及与微血管密度的关系,初步探讨MK与血管生成的可能关系。  1资料与方法  1.1资料收集川北医学院附属医院病理科2003年1月~6月间具有完整临床病理资料的手术切除食管鳞癌45例。男性35例,女性10例,年龄38~72岁(平均57.9岁)。组织学上:高分化鳞癌17例,中等分化22例,低分化6例。术前均无放疗、化疗及其他治疗史。另选10例正常食管组织作对照研究。  1.2方法  1.2.1试剂羊

5、抗人MK单克隆抗体及试剂盒购自美国SantaCrue公司,鼠抗人CD34单克隆抗体及试剂盒购自福州迈新公式。  1.2.2免疫组化染色方法将原病理常规石蜡包埋的蜡块作4μm切片,每例作连续切片3张,分别作HE染色、MK,CD34免疫组织化学SP法染色。各组织切片常规脱蜡及水化后,依次按说明书完成免疫组化染色各步骤。所有切片均在同一实验室,由同一技术人员使用同一批号试剂完成免疫组织化学染色。用已知阳性对照片作阳性对照,用PBS代替一抗作阴性对照。  1.3结果判断MK阳性判断:凡细胞质和/或细胞膜出现清晰的棕黄色染色的细

6、胞即为阳性细胞。结果以阳性细胞所占百分比表示。无MK抗体免疫反应细胞存在为阴性(-),MK抗体免疫反应细胞数≤30%为弱阳性(+),MK抗体免疫反应细胞>30%为强阳性(++)。每张切片随机选取5个代表性的视野计数100个细胞。肿瘤MVD测定方法:按K蛋白表达与各临床病理指标间的关系处理采用χ2检验,MVD与临床病理指标间的关系处理采用方差分析。  2结果  2.1食管鳞癌组织中MK蛋白的表达特征与MVD的计数和分布特征在正常食管黏膜组织及癌旁组织中未见MK蛋白表达或仅见微弱表达,而在食管鳞癌中明显表达,主要位于胞质和

7、胞膜上(图略)。45例食管鳞癌中35例为阳性,表达率为77.8%,其中14例为强阳性。食管鳞癌细胞外间质中尚见纤维组织、小血管内皮细胞及弹力膜着色。血管密集处MK表达较高。食管鳞癌组织中血管内皮细胞阳性染色主要位于癌灶边缘(图略),且在肿瘤浸润前缘血管密度高于其他区域,MVD均值为37.31±6.89。  2.2食管鳞癌组织中MK蛋白表达及MVD与临床病理的关系,见表1。  表1MK的表达及MVD与食管鳞癌的临床病理的关系(略)  2.3食管鳞癌组织中MK蛋白表达与MVD的关系MK表达阳性的食管鳞癌组织平均MVD为40

8、.43±6.27,MK表达阴性的食管癌组织MVD为31.34±3.89,F值为21.5,两者有显著性差异(P<0.01)。  3讨论  中期因子(MK)是一个新发现的肝素结合性生长因子,已有报告指出,在KmRNA高水平表达,可能参与肿瘤发生、演进、生长及转移过程[1,5,6],并且有人研究发现,中期因子对肿瘤新生血管的生成具有明显

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