降钙素对兔骨关节炎关节软骨的保护作用论文

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1、降钙素对兔骨关节炎关节软骨的保护作用论文.freelinoglycans，GAG)和Ⅱ型胶原含量保护关节软骨。关键词：降钙素；骨关节炎；灰度值Abstract：［Objective］Toassessentalosteoarthritis.［Method］TonthNely.Allrabbitsunderenttransection(ACLT)ontherightknee.Rabbitsofexperimentalgroupbegantoreceiveadaffysubcutaneousinjectionofsalmoncalcitoninatadoseof5IUperkgofbodyalsal

2、ine(NS)atthesamedose.Allrabbitsinedgrosslyandhistologicallyandscored;themedialcondylesectionsmunohistochemistryofcollagenII.ankin法［5］评分；番红“0”染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色切片用HPIAS-1000系列多功能真彩色病理图像分析系统软件分析，分别于10倍物镜下以负重区为中心，在关节软骨图像辐射层和柱状层各随机取10个区域测定其灰度值以均值表示测定结果。15统计学分析方法全部数据采用spss100统计软件，作t检验。2结果21肉眼大体观察结果对照组健侧膝关节外观正

3、常，关节滑液清，关节面光滑，关节软骨略显淡蓝色，有光泽。对照组术侧膝关节肿胀严重，胫骨平台和股骨髁均可见骨性肥大。滑液色黄且混浊，滑膜亦呈黄色。关节面粗糙不平整、无光泽，颜色暗红，关节软骨破坏，关节边缘有大量骨赘形成，符合骨关节炎病理特点。实验组术侧膝关节稍肿胀，未见胫骨平台和股骨髁有骨性肥大。滑液淡黄色。关节面欠光滑，无光泽，部分区域颜色发暗，有少量骨赘形成。实验组手术膝关节损害较对照组手术膝关节轻。22细胞形态学观察对照组健侧膝关节股骨内髁关节面平整，光滑，HE染色基质染成粉红色，着色均匀，软骨细胞核呈深蓝色，细胞层次清楚，排列整齐，大小均一(图1)。对照组术侧标本可见关节面大部分区域粗糙

4、，可见达软骨中层和深层的裂隙或缺损，裂隙周围可见大量细胞克隆现象及克隆细胞周围大量软骨细胞消失(图2)，基质染色重度不均，软骨细胞排列紊乱；有的区域软骨细胞核消失，留下空的软骨囊。有的切片可见明显的丘状隆起的骨赘。实验组术侧部分区域关节面粗糙；基质染色中度不均，可见细胞簇聚多见，有的可见少量的软骨细胞坏死区，细胞克隆现象偶见(图3)。按Mankin评分标准结果见表1。表1三组膝关节标本光镜下Mankin评分结果(略)23三组膝关节番红“0”和Ⅱ型胶原免疫组化染色切片灰度值番红“0”染色软骨细胞核和基质均染成粉红色，空白对照组着色均匀；ACLT组基质染色重度不均，可见细胞克隆和细胞减少；ACLT

5、+CT组可见关节面粗糙，基质染色轻度不均(图4～6)。Ⅱ型胶原免疫组化细胞基质染成棕黄色，各组情况与番红“0”染色相似(图7～9)。灰度值测量结果见表2。表2番红“0”及Ⅱ型胶原免疫组化灰度值(略)3讨论本实验结果发现细胞组织形态学评分对照组术侧膝关节明显高于对照组健侧。表明本实验的骨性关节炎动物模型复制成功。番红“0”染色灰度值和II型胶原免疫组化染色灰度值测量术侧高于健侧，表明术侧GAG和Ⅱ型胶原含量低于健侧，说明在OA进程中伴随着GAG和Ⅱ型胶原的破坏和丢失。实验组术侧和对照组术侧关节细胞组织形态学评分后者明显高于前者，说明对照组术侧关节软骨损害大于实验组术侧，表示降钙素对关节软骨有保护

6、作用，这与Badurski［3］和ManicourtDH［4］等研究结果一致。同时，对照组番红“0”染色灰度值和Ⅱ型胶原免疫组化染色灰度值测量显著高于实验组，说明对发生OA的关节软骨，降钙素促进了软骨细胞分泌GAG和Ⅱ型胶原，或阻止了这两种物质的分解。在以兔作为实验动物制作的骨关节炎模型中，Badurski采用了每次给药7IU／kg，每周2次的用法，相当于每天2IU／kg［3］。为了尽量与降钙素临床应用方法相近，本实验用每天给药1次的方法。使用剂量以人的标准剂量1～2IU／kg为基准，经过人与动物剂量换算公式计算设定为5IU／kg，高于Badurski的2IU／kg。实验结果证明了这种剂量的降

7、钙素对OA有保护作用，据此推断临床应用降钙素治疗骨质疏松的常规剂量1～2IU／kg可能对骨关节炎有治疗作用，值得进一步临床观察研究。降钙素对关节软骨保护作用的机制尚在探索。有许多实验报告，降钙素可以使软骨细胞合成糖胺多糖的能力增加。用体外培养胎牛股骨软骨细胞摄取14C标记的葡萄糖的方法证明了这一点［6］;体外软骨细胞培养对４５Ca追踪测量法证实了降钙素能够促进软骨细胞合成糖胺多糖和对钙的摄取；Ba