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1、脑膜瘤MMPs和TIMPs的表达意义论文吴茂春，袁先厚，文志华，江普查【关键词】脑膜瘤【Abstract】AIM:Toinvestigatetherelationshipbeteningiomasandtheirbraininvision.METHODS:TheproteinexpressionofMMP2,MMP9,TIMP1,TIMP2munohistochemistryandthemRNAexpressionofMMP2,MMP9eningiomas.RESULTS:ThepositiveratesoftheexpressionofMMP2
2、,MMP9alignanttumorsthanthatofnonbraininvasive，benigntumors(P0.05).TheexpressionlevelsofTIMP1,TIMP2ors(P0.05).CONCLUSION:TheexpressionofMMP2,MMP9,TIMP1,TIMP2arecriticaltobraininvasiveofmeningiomas.【Keyeningiomas;matrixmetalloproteinase(MMP);tissueinhibitorsofmetalloproteinase(
3、TIMP);immunohistochemistry;insituhybridization【摘要】目的：研究基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase,MMP2,MMP9）及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂1和金属蛋白酶组织抑制剂2（tissueinhibitorofmetalloproteinase,TIMP1,TIMP2）在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤脑浸润,病理性质的关系.方法：用原位杂交法检测45例脑膜瘤组织中MMP2,MMP9mRNA的表达；用免疫组化检测MMP2,MMP9,TIMP1和TIM
4、P2蛋白的表达.结果：有脑浸润的脑膜瘤MMP2,MMP9的表达阳性率较无脑浸润的脑膜瘤明显增高（P0.05）；非典型性及恶性脑膜瘤较良性脑膜瘤高表达MMP2,MMP9(P0.05)；TIMP1,TIMP2的表达在各肿瘤中差异无显著意义(P0.05).结论：MMP2,MMP9,TIMP1和TIMP2对脑膜瘤的脑浸润有重要影响.【关键词】脑膜瘤；基质金属蛋白酶；基质金属蛋白酶组织抑制剂；免疫组化；原位杂交0引言脑浸润是脑膜瘤重要的生物学特征，肿瘤组织产生的多种蛋白酶对细胞外基质（extracellularmatrix）和基底膜的降解是肿瘤浸润和转移的
5、首要条件［1,2］.MMP2和MMP9是最重要的基质蛋白酶［3］，TIMP1和TIMP2是MMPs的组织抑制剂［2,4］.系统地研究MMPs和TIMPs在脑膜瘤中的表达及其与脑浸润的关系，较少.我们应用免疫组化和mRNA原位杂交法检测脑膜瘤组织中MMP2.freel，免疫组化实验的切片厚约4μm.MMP2原位杂交试剂盒及MMP9探针由武汉博士德生物公司提供；鼠抗人MMP2，MMP9mAb及SP免疫组化试剂盒，DAB显色试剂盒由北京中山生物公司提供；鼠抗人TIMP1，TIMP2，GFAPmAb购自福建迈新生物公司.脑浸润用以下标准判定［5］：①有肿
6、瘤脑界面的HE染色片发现肿瘤组织浸入脑组织；②受浸脑组织中有胶质细胞增生和神经元降解；③石蜡切片GFAP（胶质纤维酸性蛋白）免疫组化染色显示阳性.以上任一标准阳性即认为肿瘤有脑浸润性.1.2方法4μm厚石蜡切片按免疫组化SP法常规操作技术进行处理，DAB显色，苏木素复染，常规脱水，透明，封片.阳性对照用已知阳性片，阴性对照用PBS替代一抗.原位杂交用地高辛标记MMP2,MMP9多相寡核苷酸探针与脑膜瘤组织进行原位杂交，经预杂交，杂交后，按试剂盒说明进行，加入标记生物素的抗地高辛抗体，进行显色反应，梯度乙醇脱水，透明封片.肿瘤细胞及少数间质细胞胞质
7、内呈棕黄色颗粒为阳性.判断方法根据棕色反应的强度及面积综合评判.每张切片的阳性细胞的阳性强度按无着色、淡黄色、棕黄色和棕褐色分别记分0，1，2和3分；着色阳性面积按无着色、着色小于1/3，1/3~2/3，大于1/3分别记分0，1，2，3分.根据两项记分之和判断结果：大于等于3分为阳性.统计学处理：采用χ2检验，P0.05为有显著性差异.2结果2.1组织学类型与脑膜瘤浸润性GFAP应在正常或肿瘤性星形胶质细胞胞质表达，而本组45例脑膜瘤中有10例呈阳性（Fig1），总脑浸润率为22%.非典型性与恶性脑膜瘤的脑浸润率分别为40%（2/5)和88%(7
8、/8)，明显高于良性脑膜瘤的脑浸润率3%(1/32)，两者比较差异显著（P0.05,）.2.2MMPs,TIMPs的表达MMP2，MMP
