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1、外源性ATP对大鼠移植胰腺的作用及机制【关键词】胰十二指肠移植；三磷酸腺苷；细胞凋亡；细胞胀亡 ProtectiveeffectofexogenousATPontransplantedpancreasinratsanditsmechanism 【Abstract】 AIM:Tostudytheprotectiveeffectofexogenousadenosinetriphosphate(ATP)ontransplantedpancreasinratsanditsmechanism.METHODS: Theallogene
2、icmaleSDratmodelsofheterotopicininbothgroups.Bloodsugar，plasmaconcentrationsofamylaseandlipaseinedandhistologicalobservationedat0,1,6and12hafterreperfusion.TheconcentrationofATPinpancreatictissueined.Thepercentagesofnormal,apoptoticandoncoticcellseasured.RESULTS:Lig
3、htmicroscopicobservationshoorphologicalchangesofpancreasinATPgroupuchmilderthanthoseincontrolgroup.Thebloodsugarconcent,plasmaconcentrationsofamylaseandlipaseylase,P0.01).TissueconcentrationofATPinATPgroupepointsafterreperfusion(0,1,6h,P0.01;12h,P0.05).Tissueconcent
4、rationofATPhadasignificantnegativecorrelationechanismoftheprotectiveeffectmaybeliesinthatATPcandecreasethepercentageofoncoticcells. 【Keyin后行移植手术，检测再灌注0,1,6,12h时血糖、脂肪酶、淀粉酶含量，同时检查胰腺组织病理学变化，ATP含量及凋亡、胀亡细胞百分数.结果：ATP组胰腺组织结构损伤明显轻于对照组，ATP6,12h组血糖、血清淀粉酶、脂肪酶含量明显低于同时间点对照组(血糖，
5、脂肪酶，P0.05；淀粉酶，P0.01)，ATP0,1h组胰腺组织ATP含量明显高于同时间点对照组（P0.01），ATP组各时间点胀亡细胞百分数明显小于同时间点对照组(0,1,6h,P0.01;12h,P0.05)，ATP含量与胀亡细胞百分数明显负相关（r=-0.756,P0.01）,与凋亡细胞百分数无明显相关.结论：外源性ATP对移植胰腺有保护作用，减少胰腺组织细胞胀亡的发生可能是其重要的保护机制. 【关键词】胰十二指肠移植；三磷酸腺苷；细胞凋亡；细胞胀亡 0引言 提高移植物低温保存质量，减少移植物细胞死亡是移植成功的
6、重要因素〔1-2〕.有资料显示，外源性三磷酸腺苷(ATP)能够进入低温保存的胰腺细胞内〔3〕.我们通过补充外源性ATP以提高移植器官内ATP的储备，研究其对胰腺组织中能量代谢以及细胞死亡方式的影响，探讨外源性ATP对移植胰腺的作用及机制. 1材料和方法 1.1材料采用健康清洁级、近交系封闭群SD大鼠96只，均为雄性，体质量250~300g，由徐州医学院实验动物中心提供.实验前1g/kg一次注入链脲霉素(美国Sigma公司)制备非空腹血糖>19.4mmol/L的糖尿病模型.实验分为2组：对照组，供体胰十二指肠单纯用4℃
7、肝素平衡盐液（150ku/L,15~20mL)灌注并保存60min后行移植手术；ATP组，供体胰十二指肠用4℃肝素平衡盐液添加ATP（5mmol/L,15～20mL）进行灌注并保存60min后行移植手术.两组按移植后再灌注时间各分为再灌注0,1,6,12h亚组（每亚组12只大鼠）. 1.2方法采用全胰十二指肠移植模型，供体胰十二指肠根据分组分别用4℃肝素平衡盐液和添加了ATP的肝素平衡盐液灌注并保存60min.切除受体左肾,将供体带腹腔动脉和肠系膜上动脉的腹主动脉段与受体腹主动脉端侧吻合，供体门静脉与受体左肾静脉行端端吻合，
8、供体的十二指肠近端关闭，远端与受体Treitz韧带下2cm空肠作端侧吻合.分别于设计时间点经下腔静脉采血后处死动物并切取移植胰腺行各项检查.血糖测定采用美国强生血糖仪，淀粉酶、脂肪酶测定采用日立7600010型全自动生化仪.切取部分胰腺标本制成石蜡切片后行HE染色，光镜下观察
