益气活血中药对放射性肺损伤大鼠血清及肺组织et1表达影响的实验研究

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1、益气活血中药对放射性肺损伤大鼠血清及肺组织ET1表达影响的实验研究：李凤玉，王炳胜，刘秀芳，张海，石军，葛艳丽【摘要】目的探讨血浆及肺组织中ET1在放射性肺损伤中的改变及益气活血中药对其治疗作用。方法96只ethods96lydividedintoirradiationgroup,irradiationbroxoltreatedgroupandnormalcontrolgroup.Thefirstthreegroupsithoraxbylinearacceleratoralsaandlung

2、tissueseasuredbyELISAandimmunoreactivityrepectivelyattheendofthe4th,6th,8th,12th,and26thonaryedemaandpneumoniaaggravatedgraduallyinCgroup,pulmonaryedemaandpneumoniaofAandBgroupaandlungtissuesincreasedrapidlyinCgroup,theET1levelsinplasmaandlungtissues

3、ofAgroupilartothatofBgroup(P＞0.05),andaandlungtissuessignificantly.Thismightbeoneoftheirmechanismsintreatmentofradiationinducedlunginjury.　　Keyp;D公司，美国）。兔抗-内皮素多克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司提供，抗兔IgG由华美生物工程公司提供。　　1.2实验方法　　1.2.1实验分组96只大鼠随机分为4组，照射加中药组（A组）30只、照射加氨溴索

4、组（B组）30只、单纯照射组（C组）30只、空白对照组（D组）6只。　　1.2.2模型制作A、B、C三组大鼠均采用6MVX直线加速器照射右肺，照射前使用戊巴比妥钠0.04g/kg腹腔麻醉，俯卧于平台，模拟机下定位，铅块遮挡左肺及纵隔，照射野3cm×3cm，总量30Gy，5Gy/次，1次/周，照射后等待大鼠自然苏醒，D组大鼠只麻醉不进行照射。分别于照射开始4、6、8、12、26周末，各组随机抽取6只处死，取其血清及肺组织标本进行相关指标检测。　　1.2.3给药方式取中药黄芪、党参、当归、川芎、地龙

5、、香附等份，水煎、醇沉、浓缩、分装、消毒备用，生药含量2g/ml，A组每日灌胃1ml药物，B组每日氨溴索灌胃50mg/kg。　　1.3检测项目（1）血清ET1含量测定：方法按ELISA检测试剂盒说明书进行。（2）病理观察：取大鼠右中下肺浸入100g/L甲醛固定，常规石蜡包埋，切片(5um)，HE染色，显微镜下观察。（3）免疫组化：按说明书操作，阳性为细胞质黄色，棕色和棕黑色，据文献[2]将染色结果分为0～4级：0级为阴性，1级为灶状阳性，2级为弥漫性弱阳性，3级为弥漫性中等阳性，4级为弥漫性强阳

6、性。每组6张切片，每张切片选2个阳性表达的低倍镜视野。　　1.4统计学方法实验结果以x±s表示。应用SPSS13.0统计分析软件对实验数据进行统计学处理。采用单因素方差分析（F检验和q检验）进行各组间比较。P＜0.05为有统计学意义。　　2.2ET1血清含量测定结果见表1。C组照射后1周ET1高于D组(P<0.05)，2、4、8周随着病程的延长，放射性肺损伤的加重而逐渐明显升高(P<0.05)，A组、B组各时相值表达相似，均明显低于C组，差异具有统计学意义(P<0.05)。　

7、　2.3ET1在肺组织中的表达正常肺组织ET1在支气管上皮，血管平滑肌及其周围间质，肺泡巨噬细胞和肺上皮细胞有灶状阳性表达。ET1在肺组织各组的表达，见表2。C组照射后ET1在支气管上皮、肺上皮细胞、巨噬细胞、炎症细胞处阳性表达细胞数增多，有的连成一片，表达逐渐增强，血管平滑肌及周围ET1染色阳性从血管内皮细胞至血管周围，4、8周时表达差异有统计学意义(P<0.05)。益气活血中药及氨溴索治疗4、8周能抑制ET1表达(P<0.05)。　　表1各组血清ET1含量（略）　　与

8、C组比较，①P＜0.05；与D组比较，②P＜0.05　　表2各组ET1在肺组织中的表达（略）　　与C组比较，①P＜0.05；与D组比较，②P＜0.05　　3讨论　　本研究通过直线加速器复制的大鼠放射性肺炎模型与David等[1]相似，益气活血中药能明显减轻肺水肿及炎症细胞渗出，效果较好。中医学认为，射线是热毒之邪，可损伤人体正气和阴血。从症状上看，急性放射性肺炎属咳、喘范畴，病机为肺热血瘀、气阴两伤、宣肃失司。因此，放射性肺损伤之病机以气虚血瘀为主，治疗以益气活血为主。本实验中黄