益气补肺方对急性肺损伤大鼠et

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1、益气补肺方对急性肺损伤大鼠ET作者：杨勇傅晓青董礼文王军程根苗【摘要】目的探讨益气补肺方对油酸性急性肺损伤大鼠的ET-1和MIF水平及肺组织学的影响及保护机制。方法将动物随机分为五组：中药组、西药组、中+西药组、模型组、正常组。用油酸诱发急性肺损伤，观察造模后大鼠肺系数、肺组织匀浆ET-1和MIF水平、肺组织学改变。结果与油酸组比较，中药组与中+西药组ET-1和MIF水平明显降低（P<0.05），其中3组用药组间ET-1水平差异具有显著性（P<0.05）。结论益气补肺方对油酸诱发的大鼠急性肺损伤有

2、一定的保护作用，抑制ET-1和MIF生成是其作用机制之一。【关键词】益气补肺方急性肺损伤ET-1MIF肺组织学　　【Abstract】ObjectiveTostudyeffectsandmechanismof"YiQiBuFEiFormula(YBF)"onET-1andMIFlevelsandlunghistologyinacuteratslunginjury(ALI)inducedbyolEIcacid.MethodsTheratslydividedintofivegroups:YBF,dexametha

3、sone(DXM),YBF+DXM,positivecontrol,negativecontrol.Themodelinationsongthe3treatinggroupsinET-1level.ConclusionsYBFprotectsthelungfromacuteratslunginjuryinducedbyoleicacidbyinhibitingET-1andMIF.　　【Keyacrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)Histologicchange　　急性

4、肺损伤(ALI)是心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭，严重者定义为急性呼吸窘迫综合征（ARDS），是临床常见的急重症病变。作者自2005年7月至2007年7月在益气补肺方临床应用有效的基础上［１］，观察油酸性急性肺损伤大鼠血浆内皮素1（ET-1）和巨噬细胞移动抑制因子（MIF）水平，探讨益气补肺方对ALI的保护机制。　　1材料与方法　　1.1动物与分组SD雄性大鼠50只，体重190～245g，平均（220±20）g，（上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，微生物指标符合美国SPF级动

5、物标准），自由饮食，在室温20～23℃，湿度45％条件下饲养（浙江中医药大学动物实验研究中心提供）。随机分为中药组(A组)、中+西药组(B组)、西药组(C组)、模型组(D组)、正常组(E组)，每组各10只。　　1.2动物处理及模型制作灌胃：A组和B组以益气补肺方（生黄芪30g，当归、人参、天冬各6g,五味子、甘草各3g；药物浓度4.5g/ml)，2ml/d灌胃，共3d，其余组灌以生理盐水2ml/d；尾静脉注射：B组和C组尾静脉注射地塞米松1mg/kg（××制药股份有限公司），共3d，余组以生理盐水注入。第3天

6、各组相应处理1h后尾静脉注入油酸0.2ml/kg造模（E组注入生理盐水），造模1h后以2.5%戊巴比妥（2ml/kg）腹腔麻醉后取标本。　　1.3肺系数取全肺，滤纸吸干表面水分，称湿重，计算肺系数(脏器湿重／体重×100%，重量均以g为单位)，以百分比(％)表示。　　1.4肺组织匀浆ET-1和MIF水平（1）肺组织匀浆制备：取大鼠右肺中叶约100mg，吸去血液，生理盐水冲洗，液氮研磨后加入1ml的细胞裂解液混匀，4℃12000r/min离心10min，取上清液，-70℃保存待测；（2）采用酶标免疫法：严格按照

7、试剂盒（BIOSOURCE公司生产）说明书操作测定ET-1和MIF值。　　1.5肺组织学（1）标本制作：取大鼠右肺下叶约1mm×1mm×1mm，以10%甲醛固定24h，常规脱水、浸蜡、石蜡包埋切片，HE染色，封片；（2）分级标准：光镜下将肺脏组织学改变程度分为无、轻、中和重4级进行比较性研究［２］,比较内容包括毛细血管充血,肺泡腔纤维蛋白渗出,肺泡腔及其间隔中性粒细胞渗出,肺泡间隔增宽（见表1）。　　1.6统计学处理文中数据用均数±标准差(x±s）表示，计数资料和量化后的等级资料，采用单因素方差分析；组间比较

8、采用独立样本t检验。统计学处理采用SPSS13.0统计软件包。　　表1肺脏病理改变分级标准（略）　　2结果　　2.1肺系数从表2中可以看出D组肺系数最大，E组最小，其余3组数据在两者之间，5组间差异具有统计学差异（P<0.05）。药物处理组间差异不具有显著性（P>0.05）。　　2.2肺组织匀浆ET-1和MIF水平5组肺组织匀浆ET-1和MIF水平均符合正态分布，方差齐性。D组ET-1和