myd88 rna干扰抑制小鼠骨髓树突状细胞成熟的实验的论文

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1、MyD88RNA干扰抑制小鼠骨髓树突状细胞成熟的实验的论文摘要】目的：针对小鼠骨髓树突状细胞（dc）髓性分化因子88（myd88），采用rna干扰技术抑制其合成，观察脂多糖（lps）刺激后dc生物学活性的变化，探讨获得耐受性dc的方法，为dc的临床应用提供新思路和理论依据。方法：培养小鼠骨髓源性dc，分为对照组、lps组及rna干扰组，对照组不予任何处理，lps组加入终浓度为1μg/ml的lps,rna干扰组于加入myd88sirna12小时后给予1μg/mllps刺激，继续培养3天。免疫细胞化学检测dcmyd88、核因子κb

2、（nfκb）的表达，yd88的表达；流式细胞术检测dc细胞表面cd80、cd86及mhcⅱ分子的变化，elisa法检测各组dc分泌tnfα。ifnγ和il12的浓度，混合淋巴细胞培养检测t细胞增殖能力。结果：lps促进dc高表达cd80、cd86及mhcⅱ分子，促进th1型细胞因子释放、myd88高表达及nfκb核移位，并诱导t细胞增殖，myd88sirna可阻断lps的这些效应。结论：myd88sirna可抑制dc成熟，产生耐受性dc，增强同种未成熟dc的免疫耐受诱导作用，为进一步研究dc的临床应用奠定了基础。【

3、关键词】树突状细胞myd88rna干扰脂多糖　　inhibitioneffectofmyd88sirnatotheactivationofdendriticcellsfrommurinebonemarroentofcardiovascularsurgery,unionhospital,tongjimedicalcollege,huazhonguniversityofscienceandtechnology,pactofmyeloiddifferentiaionfactor88(myd88)sirnaonthebiological

4、activitiesofdendriticcells(dcs)culturedfrommurinebonemarroulationbylipopolysaccharides(lps),andprovidenovelideasandbasisofdc’sclinicalapplications.methods:mousedcsbonemarrol.myd88sirnalmunochemistryyd88andnfκb.yd88.floetryandmixedlymphocytereaction(mlr)ulationincrea

5、sedthecd80,cd86,mhcⅱonthemembraneofdcsandtnfα,ifnγ,il12concentrationinthesupernatant.lpsstimulationalsoincreasedthemyd88inthecytoplasmandpromotedtranslocationofnfκbtokaryon.myd88sirnacaninhibitalltheseresponess.conclusion:myd88sirnacansuppressmaturationofdcsandp

6、romotethetoleranceinductioneffectofdcs.［keyyd88；rnainterference；lipopolysaccharides　　树突状细胞(dendriticcell，dc)是体内功能最强的抗原提呈细胞，其功能与成熟状态密切相关，具有激发免疫应答和诱导免疫耐受的双重作用，参与炎症、肿瘤、自身免疫性疾病及移植排斥反应等多种病理生理过程。.利用dc具有诱导t细胞免疫耐受的特性，构建耐受性dc用于治疗自身免疫性疾病目前研究表明，toll样受体及其信号途径在调控dc成熟过程中起重要作用，阻断t

7、oll样受体信号途径是有效获取耐受性dc的方法之一［2］。髓性分化因子88（myd88）是toll样受体信号途径中重要的衔接分子，其功能缺陷可导致信号传导中断。本实验应用rna干扰技术抑制myd88合成，观察小鼠骨髓dc生物学活性的变化，以期获得耐受性dc，为dc的临床应用提供新思路和理论依据。　　1材料与方法　　1.1试验材料　　近交系balb/c小鼠和c57雄性小鼠，6～10周龄，购自华中科技大学同济医学院器官移植研究所；10%fcs和rmpi1640培养液（gibco公司）；重组小鼠gmcsf（rmgmcsf，pepr

8、otech公司）；lps(invivogen公司)；fitc标记的抗小鼠cd80及cd86购自biolegend公司；fitc标记的抗小鼠mhcⅱ类分子抗体（antimouseiad）购自pharmingen公司；小鼠细胞因子定量检测elisa试剂盒购自晶美