红穗和白穗醋栗f3h的克隆及其在果实成熟过程中的表达分析

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1、园艺学报，2016，43(10)：2003–2011.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0229；http：//www.ahs.ac.cn2003红穗和白穗醋栗F3H的克隆及其在果实成熟过程中的表达分析1,221,2,*王海竹，闫海芳，徐启江12（东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨150040；东北林业大学生命科学学院，哈尔滨150040）摘要：以红穗醋栗（RibesrubrumL.）和白穗醋栗（R.albrumL.）果实为试材，采

2、用RACE方法克隆黄烷酮3–羟化酶（F3H）基因cDNA全长序列，分别命名为RrF3H和RaF3H（KU984435和KU984436）。RrF3H全长1351bp，开放阅读框长1098bp，编码365个氨基酸；RaF3H全长1291bp，开放阅读框长1098bp，编码365个氨基酸。氨基酸多序列比对表明该基因编码的蛋白具有非血红素双加氧酶结构域（DIOX-Nsuperfamily）和典型的F3H蛋白功能结构域（2OG-FeⅡ_Oxy加氧酶结构域），属于双加氧酶超家族。系统发育分析表明，RrF3H和RaF3H在进化上具有明显

3、种属特性，属于相对独立的进化分支。定量PCR分析表明，F3H在红穗醋栗中表达量远远高于白穗醋栗，在红穗醋栗中随着果实着色加深表达量逐渐上升，果实着色约75%时表达量最高，之后下降；白穗醋栗中随着果实生长，该基因的表达下降，花色苷含量也呈下降趋势，说明F3H基因在醋栗果实着色过程中发挥作用。关键词：红穗醋栗；白穗醋栗；花色苷；F3H；基因克隆中图分类号：S663.9文献标志码：A文章编号：0513-353X（2016）10-2003-09MolecularCloningandExpressionAnalysisofF3HGen

4、einRibesrubrumandR.albrumDuringFruitMature1,221,2,*WANGHai-zhu，YANHai-fang，andXUQi-jiang1（TheStateKeyLaboratoryofTreeGeneticsandBreeding，NortheastForestryUniversity，Harbin150040，China；2CollegeofLifeSciences，NortheastForestryUniversity，Harbin150040，China）Abstract：Re

5、dcurrant（RibesrubrumL.）andwhitecurrant（R.albrumL.）fruitswereusedasmaterials，twofull-lengthcDNAsequencesofF3HgenewereclonedusingRACE（rapidamplificationofcDNAends），anddenotedasRrF3HandRaF3H.Bothofthemcontaineda1098bpopenreadingframethatencodedadeducedproteinwith365am

6、inoacidresidues.Aminoacidsequencealignmentshowedthattheproteinhadanon-hemedioxygenasedomain（DIOX-Nsuperfamily）and2OG-FeⅡ-dependentdioxygenasesuperfamily.Phylogeneticanalysisshowedthat，RrF3HandRaF3Hhadobviouscharacteristicsofspeciesinevolution，whichhadanrelativeinde

7、pendentevolutionarybranch.QuantitativeRT-PCRanalysisshowedthat，duringtheperiodoffruitdevelopmentF3Hexpressioninredcurrantwas收稿日期：2016–06–01；修回日期：2016–10–13基金项目：国家基础科学人才培养基金项目（J1210053）；中央高校基本科研业务费专项资金项目（DL12CA10，2572014EA03-01）；林木遗传育种国家重点实验室创新项目（2013A06，2013B010）；黑

8、龙江省博士后科研启动金项目（LBH-Q14011）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：qijiangxu@126.com；Tel：0451-82191783）WangHai-zhu，YanHai-fang，XuQi-jiang.Molecularclon