黄瓜果实发育相关基因的克隆及其表达调控的研究

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1、浙江大学硕士学位论文黄瓜果实发育相关基因的克隆及其表达调控的研究姓名：叶青静申请学位级别：硕士专业：蔬菜学指导教师：喻景权2003.6.1致谢零额突蹩在导摔穰蒙投教授熬悉。◇撂导下究残熬，劳骥注饕零舞强大鹣心蠹。导筛淄博的知谈、严谨的治学态度、惑我的辩磺精弹、敏锐靛溆察力给我留下了深刻的印象，让我受焱蘸浅。三年来，髭论在学渡上，还是程生激土都得到了嚣9蕈无徽季至熬关蟠帮照矮，爨发巍教鼯。遽鐾乏对老努瓣教海表示衷心靛感瀣，荠致戳崇高的敬意。褰三年静实验秘究麓阗，褥裂了郭泽建教授熬裁璐窝攒纛，令我齐

2、瓣了裰辩，使实验得以顺利进行，谯此表示宸心的感谢。爨辩三零慕鞠夕稳楚、共弱学习王终熬强弟翅赫裁，缝{}j是：时素芬、蕊稳甄、郑军辉、黄黎锋、彭察辉、吕盒《、邹丽装、朱隆静、臀娟利、毛伟华、师凯、孙瑶、辫疆、交庚肇、齐怒燕、受学楚、蘸熬罄、壬轾葵等，稳戆嚣j穗娥懿磊予绘我露下了许多美好的隧忆。将粼惑落攀英辩鼹辩浅学习翻垒满熬瑾瓣、关，貉与茺私摆韵l鬣瑟，黉辩一蹙美爱麓我静父母释家久致淤诫蘩静惑游，没裔缝{fj在生活上的关心、支持葶拜付出，我鼹难以jl啜零』完成学业的。甘毒赘20∞年S露撬州牮家涟摘

3、要}f种子植物的座果需要一个授粉受精的过程，雌雄异花的瓜类是我国设施栽培中的重要蔬菜，生产上经常因阴雨天气、低温弱光或缺少雄花等因素而引起授粉受精不良，最后导致果实败育即“化瓜”现象，影响了瓜类的早熟、高产，降低了设施栽培蔬菜的经济效益，成为当前瓜类蔬菜设施栽培一个普遍而严重的问题。因此研究瓜类果实座果不仅可以加深有关果实发育的基础理论，也有助于我们克服“化瓜”现象、提高果实产量与效益√本文以黄瓜津春2号(CucumissativusL、CYJinchun2)、津春4号(Cucum捃sativu

4、sL、CYJinehun4)品种为试材，研究了CPPU(N．(2一氯一4一毗啶基)．N’一苯脲)对其单性结实果实发育的效果，在此基础上着重对CPPU诱导黄瓜单性结实的生理学和分子生物学机理进行了探讨，克隆并测定了黄瓜果实组织中的与细胞分裂相关的精氨酸脱羧酶(ADc)基因的eDNA序列(约1．83kb)、与细胞膨大有关的扩张蛋白基因eDNA序列(约786bp)以及一条酸性转化酶的eDNA全长序列(约2．25kb)。阴二花后未经授粉的非单性结实黄瓜的雌花子房停止生长，而CPPU处理促进果实的生长并且

5、产生单性结实果，自然单性结实黄瓜的雌花子房继续生长也产生单性结实果。在未授粉子房中，精氨酸脱羧酶、扩张蛋白及酸性转化酶基因几乎不转录，但在授粉果实早期发育中，精氨酸脱羧酶、扩张蛋白基因保持较高水平，随后下降，而酸性转化酶基因的转录则在前期低后期高。CPPU处理使精氨酸脱羧酶、扩张蛋白及酸性转化酶基因的转录水平增加且作用效果更为迅速显著。同样，上述基因在单性结实果实中的表达量也保持较高水平厂扩张蛋白基因在单性结实果发育中一直都有表达，前期比后期表达丰富，酸性转化酶基因在单性结实果中的表达随着果实的

6、生长逐渐增加，精氨酸脱羧酶在单性结实果早期发育中表达丰富，随着果实的生长，表达逐渐降低。关键词：唾舒瓜j单性结实j果实发育，酸性转化酶，AbstractFlowerabortionunderunfavorableweatherconditionsisaseriousproblemincommercialproductionofeucurbitaceouscropsinspiteofartificialpollination，sincetheplantproducesalmosta11female

7、flowerswithafewmaleflowersduringthefallrfromDecembertoFebruary)andspring(fromMarchtoMay)．Inaddition，alowfruitsethasalsobeenaseriousproblemduringtherainyseasonbecauseofthesluggishactivityofpollinatinginsects．Inthisstudy，theeffectofCPPU(N-f2一chloro-4-p

8、yridyl)-N'-phenylurea)onfruitsetanddevelopmentinunpollinatedovariesofcucumber(Cucumissativus)wasdeterminedwiththeaimofincreasingfruitsetanddevelopment．Onthebaseofthat，themechanismofCPPUininducingfruitdevelopmentwasstudied。cDNAclonesforoneArginineDeca