课题1-微生物的实验室培养.ppt

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1、大肠杆菌葡萄球菌导入新课在缤彩纷呈的生物界，微生物似乎显得过于微小与沉寂。然而，它们在自然界却作用非凡。放线菌真菌青霉菌黑曲霉酵母菌微生物是一般肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）想一想这些肉眼看不到的微生物是怎样获得呢？课题1微生物的实验室培养专题2微生物的培养与应用你知道固体培养基的来历吗？为了能直接观察培养物的形态及生长情况，科学家希望能将微

2、生物培养在固体表面上，就像微生物生长在橘子皮或土豆上一样。最初，德国医生罗伯特·科赫此试着用明胶作培养基的凝固剂。但是，人们很快发现，明胶在20℃以上就变软了，很难进行分离微生物的划线操作。而大多数细菌的培养温度都不低于25℃。科赫的同事WalterHesse发现琼脂比明胶更适合做培养基的凝固剂。这个改进的方法很快就被大家采纳。标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多微生物的分离、计数等半固体培养基加入琼脂较少观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由

3、已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物选择培养基添加（或缺少）某种化学物质培养、分离出特定的微生物思考：1、固体和液体培养基的区别？固体培养基和液体培养基你认为哪个更适合工业生产？为什么？液体培养基；微生物与培养基中营养物质接触充分，快速生长繁殖和产生大量代谢产物选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物

4、的无碳培养基:分离自养型微生物加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成其细胞壁是由纤维素、几丁质、葡聚糖组成牛肉膏（BeefExtract）又称牛肉浸膏，是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。现在，市场上出现了一些熟食店、面馆为牟利而用牛肉膏将猪肉“变”牛肉的现象蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨，而大豆蛋白胨等则是植物性蛋

5、白胨。动物性来源的蛋白胨还有：蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。蛋白质分解产物，如将牛肉、酪蛋白、牛奶粉、白明胶、大豆蛋白、丝蛋血纤维蛋白等为原料，经不完全的水解工艺所得的产物。市售产品以淡黄至棕黄色粉剂为主。其分子量介于月示和肽之间，约2000左右。不同来源的蛋白质和不同的水解条件，其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水，过热不凝固，在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料，也有用作啤酒等产品的稳定剂。鲜骨蛋白胨采用新鲜骨为原料，经

6、发酵喷雾干燥而成。广泛用于黄原胶、食品添加剂、医药中间体、生物制品等发酵产品中菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。观察菌落特征。如：粗糙与光滑程度2、记得不用显微镜如何区分S型细菌和R型细菌吗？二、无菌技术1、什么是无菌技术无菌技术泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。[思维激活]用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70%与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？提示酒精擦拭属化学消毒，酒精消毒时，70%的酒精杀菌效

7、果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时

8、以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌孢子细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒灭菌较为温和强烈部分生活状态的微生物不能全部