2019专题2课题1-微生物的实验室培养ppt课件.ppt

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1、课题1微生物的实验室培养微生物的类群微生物原核类:真核类非细胞类:细菌、支原体、放线菌、蓝藻个体微小、结构简单酵母菌、霉菌、食用菌真菌:原生生物:藻类、原生动物(如:草履虫、变形虫等)病毒、类病毒、朊病毒◆微生物的共同特点:微生物基础知识一、基础知识(一)培养基1、概念人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2、培养基的类型和用途(1)按物理性质划分:①液体培养基③半固体培养基②固体培养基注:(固体、半固体培养基需添加凝固剂,如琼脂;两者的差别是添加量的多、少;液体培养

2、基不加凝固剂。)(工业生产)(微生物保存、分离、鉴定、活菌计数)(观察微生物的运动、分类、鉴定)液体培养基与固体培养基(2)按化学成分划分:①合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化合物配制)(微生物的分类、鉴定)②天然培养基含化学成分不明的天然物质(工业生产)(3)按用途划分:①选择培养基加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要微生物的生长。(分离微生物、进行选择培养。)②鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同种类的微生物

3、。(微生物的鉴定)青霉素抗青霉素基因基因工程,对导入重组质粒的大肠杆菌的筛选选择培养基不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌伊红-美蓝AABBCCDD大肠杆菌在伊红-美蓝培养基上菌落呈现黑色注:病毒专性活细胞寄生,目前不能利用人工培养基来培养,需接种在动植物组织中才能增值。常用于培养动物病毒的是活鸡胚。鉴别培养基3、培养基的成分不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、氮源和无机盐

4、。(1)碳源为微生物提供所需碳元素的营养物质,需要量最大。①概念:②来源:无机碳源:CO2、NaHCO3等(自养型微生物)有机碳源:糖类(异养型微生物)、脂肪酸、花生粉饼、石油等③作用:构成微生物的细胞物质和一些代谢产物;思考:大肠杆菌,硝化细菌,蓝藻,乳酸菌分别选用哪种碳源?糖类,二氧化碳,二氧化碳,糖类牛肉膏(BeefExtract)又称牛肉浸膏,是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味,易溶于水,水溶液呈淡黄色。现在,市场上出现了一些熟

5、食店、面馆为牟利而用牛肉膏将猪肉“变”牛肉的现象蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。蛋白质分解产物,如将牛肉、酪蛋白、牛奶粉、白明胶、大豆蛋白、丝蛋血纤维蛋白等为原料,经不完全的水解工艺所得的产物。市售产品以淡黄至棕黄色粉剂为主。其分子量介于月示和肽之间,约2000左右。不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶

6、于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。鲜骨蛋白胨采用新鲜骨为原料,经发酵喷雾干燥而成。广泛用于黄原胶、食品添加剂、医(2)氮源①概念:为微生物提供所需氮元素的营养物质。②来源:无机氮源:N2、NH3、NH4+、NO3-等。(固氮微生物,硝化细菌)有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等(异养型微生物)③作用:主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。注:“含C、N”的有机物常是

7、异养微生物的氮源,也是碳源,即有些化合物作为营养要素成分时并不是单一方面的作用。思考:培养根瘤菌、大肠杆菌、硝化细菌时分别需要哪一类氮源?N2,铵盐或硝酸盐,NH3(3)水(4)无机盐(5)培养基内所需的其他条件①概念:微生物生长不可缺少的微量有机物。注:并不是所有微生物都需要添加特殊营养物质,有些需要添加,原因是它们自身缺乏合成这些物质的酶或合成能力有限。如:培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素。②来源:维生素、氨基酸、碱基等。③作用:酶、核酸的组成成分。Ⅰ、特殊营养物质(生长因子)Ⅱ、pH值

8、如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性。Ⅲ、氧气的含量如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。4、培养基的配制原则(1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的)(2)营养协调(注意营养物质的浓度和比例)(3)pH适宜(4)温度适宜(二)无菌技术1、概念泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。获得纯净培养物的关键(目的):防止外来杂菌的入侵。2、无菌技术包括的四个方面(措施)(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;(2)将培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;(

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