丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型检测方法的建立及应用-论文.pdf

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1、国际检验医学杂志2014午7月第35卷第13期IntJLabMed，July2014，Vd．35，No．13·临床检验研究论著·丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型检测方法的建立及应用周有良，胡春凌。，汪朝晖，任传路，胥萍，陈佩琴，刘惺(1．苏州出入境检验检疫局，江苏苏州215011；2．深圳博睿祥晖生物技术有限公司，广东深圳518050；3．中国人民解放军100医院检验科，江苏苏州215007；4．苏州市第五人民医院检验中心，江苏苏州215007)摘要：目的建立丙型肝炎病毒1a、1b、2a、3a、3b、6a亚型的核酸液相芯片分型检测方法。方法建立

2、PCR扩增及核酸探针偶联方法，将PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交，建立液相芯片检测方法，并对建立的液相芯片检测方法进行灵敏度及特异性评价，应用该方法对93份血清样本核酸进行检测。结果建立的丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型检测方法具有较高的特异性和敏感性，能对6种亚型进行检测和分型，对于HC妒la、3a和6a亚型核酸液相芯片分型检测方法的灵敏度为1×10copies／PCR；对于HCV—lb、2a和3b亚型核酸液相芯片分型拉测方法的灵敏度为1X10copies／PCR。对93份临床样本的检测结果表明，该方法具有高通量、快速、敏感、特异

3、的特点。结论本方法能对丙型肝炎病毒的6种亚型进行同时快速检测，为丙型肝炎病毒的分型检测提供一种新方法。关键词：肝炎，丙型；肝炎病毒；液相芯片；聚合酶链反应DOI：10．3969／]．issn．1673—4130．2014．13．0l9文献标识码：A文章编号：l673—413O(2014)13-171O—O4EstablishmentandapplicationofHCVgenotypeliquichipdetectionmethodZhouYouliang，HuChunling，WangZhaohui，RenChuanlu。，XuPing，

4、ChenPeiqin，LiuXing(1．SuzhouEntry一腔xiiInspenctionandQuarantineBureau，Suzhou，Jiangsu215011，China；2．ShenzhenSma7tshitgingBoc^oZ0gP5Co．，Ltd．，Shenzhen，Guangdong518050，China；3．DepartmentoJCliticalLaboratory，100HospitalofPLA，Suzhou，Jiangsu215007，China；4．LaboratoryC”ter5uzhouMunic

5、ipalFifthPeoplesHospital，SuzhouJiangsu215007。China)Abstract：ObjectiveToestaolishaliquichipmethodfordetecting6sub—genotypesofhepatitisCvirus(HCV)，includingla，1b。2a。3a，3band6a．MethodsThecouplingmethodofPCRamplificationandnucleicacidprobewasestablished．ThePCRproductandthemicr

6、ospheresmixtureofthecouplednucleicacidprobewerehybridizedforestablishingtheliquiehipdetectionmethod．Thesensitivityandspecificityoftheestablishedliquichipdetectionmethodwereevaluated．Nucleicacidin93serumsampleswasdetec—tedbythismethod．．ResultsTheestablishedHCVnucleiacidliqu

7、ichipgenotypedetectionmethodhadthehigherspecificityandsensitivity，whichcoulddetectandclassfy6HCVsub—genotypes．ThesensitivityforHCVla，3aand6asub—genotypeswas1×10copies／PCR；thesensitivityforHCV1b。2aand3bsub—genotypeswas1×10copies／PCR．Thedetectionresultsin93serumsamplesshowed

8、thatthethisgenotypingmethodhadthecharacteristicsofhighthroughput，rapidness，sentsitivityan