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1、山东农业科学2013,45(11):7~i1ShandongAgriculturalSciences麻核桃CBF基因的克隆与生物信息学分析张建朋,张士刚,陈新,徐丽,贾建云。,张力思。,刘庆忠(1.龙口市农业技术推广中心,山东龙口265701;2.泰安市农业局,山东泰安271000;3.山东省果树研究所/山东省果树生物技术育种重点实验室,山东泰安271000)摘要:CBF基因是植物CBF抗冷途径的枢纽,对增强植物抗冷能力极为重要。本研究根据已知的核桃CBF基因序列设计通用性引物,对麻核桃cDNA进行PCR扩增,成功
2、获得麻核桃CBF基因全长序列,命名为JhCBF。JhCBF全长820bp,包含一个645bp的开放读码框(ORF),编码214个氨基酸。序列分析表明JhCBF与其他物种来源的CBF具有较高的同源性,其中,与桦木科白桦的同源性最高,为61.22%;JhCBF含有一个预测的AP2结构域及CBF特有的两段短肽序列。系统进化树分析表明JhCBF与桦木科白桦的亲缘关系最近,最先聚为一类。关键词:麻核桃;CBF基因;克隆;生物信息学分析中图分类号:Q785文献标识号:A文章编号:1001—4942(2013)11—0007—0
3、5CloningandBioinformaticAnalysisofCBFGenefromJuglanshopeiensisHuZhangJianpeng,ZhangShigang,ChenXin,XuLi,JiaJianyun,ZhangLisi,LiuQingzhong(1.LongkouAgriculturalTechnologyPromotionCenter,Longkou265701,China;2.TaianAgriculturalBumau,Taian271000,China;3.ShandongIn
4、stituteofPomology/ShandongPr~inciaKeyLaboratoryofFruitTreeBiotechnologyBreeding,Taian271000,China)AbstractCBFgeneplaysacentralroleinCBFcold—responsepathwayinplant.Itisveryimportantinincreasingplantcoldtolerance.Universalprimersweredesignedaccordingtopublishedw
5、alnutCBFgenes,andthenPCRamplificationwascarriedoutusingJuglanshopeiensiscDNA.Finally,theJuglanshopeiensisCBFgenewasobtained,namedJhCBF.Thefull—lengthofJhCBFwas820bp,containinganopeningread-ingframe(ORF)of645bp.Thededucedproteinhad214aminoacids.Sequenceanalysis
6、showedthatJh—CBFsharedhighhomologywithCBFfromotherplants.Amongthem,thehomologywithCBFfromBetulaplatyphylla(Betulaceae)wasthehighestof61.22%.JhCBFcontainedapredictedAP2domainandtwopep-tidesequenceswhichwerespecifictoCBF.PhylogenetictreeanalysisindicatedthatJhCB
7、Fhadtheclosestre-lationshipwithCBFfromBetulaplatyphylla(Betulaceae),andtheywereclusteredintoonegroupfirstly.KeywordsJuglanshopeiensisHu;CBFgene;Clone;Bioinformaticanalysis麻核桃(JuglanshopeiensisHu)属胡桃科核桃中属于最高档次的品种。低温冻害是影响核(Juglandaceae)胡桃属(Juglans),主要分布在河桃生长发育、造
8、成核桃产量和质量下降的主要因北、天津、山西和北京的部分山区。麻核桃集纹路素之一。南方的泡核桃引种到北方种植时,多数多变、皮质良好、造型优美等优点于一身,在文玩因低温胁迫致死,而我国独有的麻核桃能够在河收稿日期:2013—07—29基金项目:科技部科技基础工作资助项目“国家核桃板栗种质资源平台”(2013—048);农业部种质资源保护项目(2013—26);山
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