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《哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的作用及机制的初步探讨-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、·698·医学研究生学报2014年7月第鲞!』星rⅡ:旦上_l上论著(基础研究)哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的作用及机制的初步探讨李新萍,欧阳建,周敏【摘要】目的哇巴因是强心甾体类药物的一种,可诱导众多肿瘤细胞凋亡。观察哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡、hTERT、c.mycmRNA及蛋白表达的影响,探讨哇巴因抗肿瘤的作用机制。方法采用不同浓度和时间的哇巴因处理Jurkat细胞株,以加入等体积的1×PBS组作为对照组,分组为:对照组、哇巴因50nmol/L24h组、100nmol/L24h组及50nmol/L48h组、100nmol/
2、L48h组,以流式细胞术检测凋亡率;RT—PCR法检测hTERT、c-mycmRNA水平;Westernblot检测hTERT、c—myc蛋白的表达。结果药物作用于Jurkat细胞株24、48h后,对照组、50nmol/L24h组、100nmol/L24h组及50nmol/L48h组、100nmol/L48h组的细胞凋亡率分别为(4.23±1.o1)%、(5.67±3.71)%、(9.63±4.83)%、(19.67±4.55)%、(37.60±11.89)%,哇巴因50nmolfL48h组、100nmoX/L48h组的凋亡率与对照组相比差异有统计学意义(P<0
3、.05);Jurkat细胞的hTERT、e—myc的mRNA水平较对照组显著下降了200%,其hTERT蛋白表达也较对照组下降了224%,c.myc蛋白表达较对照组下降400%(P<0.05),且hTERT与c—mycmRNA及蛋白表达的降低呈正相关(P<0.05)。结论哇巴因可诱导T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡。哇巴因也可引起hTERT、e—mycmRNA及蛋白表达的下调,这可能是哇巴因可诱导Jurkat细胞株凋亡的机理之一。【关键词】哇巴因;Jurkat细胞株;凋亡;hTERT;c-myc【中图分类号】R733.7[文献标志码]A[文章编号】1008
4、-8199(2014)07-0698-04MechanismofouabaininducingtheapoptosisofTlymphoblasticleukemiaJurkatcellsLIXin—ping,OUYANGJian,ZHOUMin(DepartmentofHematology,AffiliatedGulouHospitalofNanjingUniversity,Nanjing210008,Jiangsu,China)IAbstractlobjective0uabainisacardiotonicsteroidthatcaninducetheapo
5、ptosisofmanytumorousceils.Thisstudywastoinvestigatetheanti.tumormechanismsofouabainbyobservingitseffectsontheapoptosisofTlymphoblasticleukemiaJurkatceilsandtheexpressionsofhTERTandc-mycmRNAandprotein.MethodsJurkatcellsweretreatedwithouabainattheconcentrations0f5Oand100nmol/Lfor24and4
6、8hours.andthosetreatedwith1×PBSservedasthecontro1.ThentheapoptosisrateofthecellswasdetectedbyflowcytometryafterAnnexinV/PIstaining.theexpressionsofhTERTande-mycmRNAdeterminedbyRT—PCR.andthoseofhTERTande-mycproteinbyWesternblot.ResultsTheapoptosisratesoftheJurkatcellsinthe50and100nmol
7、/Loua—baingroupswere(5.67±3.71)%and(9.63±4.83)%respectivelyat24hours,and(19.67±4.55)%and(37.60±11.89)%at48hours,significantlyhigherthan(4.23±1.01)%inthePBScontrolgroupat48hours(P<0.05).Comparedwiththecontrol,theexpressionsofhTERTandc-mycmRNAweredecreasedby200%andthoseofhTERTandc-mycp
8、roteinby224%
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