白藜芦醇对小鼠T淋巴细胞作用的初步研究

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1、目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4第一部分综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61白藜芦醇概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62白藜芦醇的免疫调节作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．1白藜芦醇对白血病细胞的细胞周期抑制和促凋亡作用⋯⋯⋯⋯⋯．．52．2白藜芦醇对免疫细胞的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“623白藜芦醇的抗炎作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。．83白藜芦醇在免疫性疾病治疗中的意义及展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯104本课题研究背景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．10第二部分实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．实验材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1l1．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．111．1．1实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．1．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．111．2实验原理与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯121．2．1小鼠淋巴结细胞的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．2．2细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．2．3CFSE检测细胞增殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··121．2．4双色荧光抗体标记分析CD69的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··131．2．5PI染色检测细胞周期(cellcycle)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．6Westernblotting检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··141．2．6．1细胞样品裂解制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·141．2．6．2SDS—PAGE胶电泳⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·141．2。6。3半干法转膜⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．2．7Bio—Plex悬液芯片检测细胞因子方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··152．实验结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··152．1RSV抑制T淋巴细胞激活⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15I嬲煳2．2RSV抑制T淋巴细胞增殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．3RSV对T淋巴细胞周期的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．4RSV对Treg细胞无影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·222．5RSV抑制多种

5、细胞因子的分泌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·．26第三部分参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27致{射⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．322南京大学研究生毕业论文中文摘要首页用纸毕业论文题目：自鍪苎醒型型!鼠!进里细照佳旦笪麴垄巫窒生物丝堂皇佥王生物堂专业星QQ昼级硕士研究生姓名：三旦生指导老师(姓名、职称)：垡壬壹(熬援2摘要白藜芦醇是一种天然植物抗毒素，广泛存在于红葡萄，花生

6、等植物果实中，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎等多种生物活性。近年来，白藜芦醇的免疫调节作用越来越受到关注，已有很多文献报道白藜芦醇对多种细胞白血病有抑制增殖和促进凋亡的作用。也有不少临床实验表明白藜芦醇对自身免疫性疾病方面具有潜在的疗效，但对其机理还未有深入研究。本研究采用小鼠四肢及肠系膜淋巴结T细胞作为研究对象，以anti—CD3／anti-CD28进行刺激活化，在体外研究白藜芦醇对T细胞的作用并初步探讨其作用机理。白藜芦醇抑制T细胞CD69表达，并抑制其增殖。进一步研究发现白藜芦醇能够阻滞T细胞细胞周期S—G2／M期的进程。Westernb

7、lot结果提示，白藜芦醇可能通过影响JNK的磷酸化水平及p53的表达起到阻滞细胞周期和抑制细胞增殖的作用。我们通过Bio．Plex悬液芯片技术发现白藜芦醇可抑制多种细胞因子、趋化因子的表达，其中对IL．1B，IL．4，IL．6，IL．9，MCP．1和TNF．0c抑制作用较为显著，提示Th2型T细胞可能对白藜芦醇更敏感。南京大学研究生毕业论文英文摘要首页用纸THESIS：．．PreliminaryInvestigationoftheeffectsof——res—v——e—r——atrol—on：SPECIALIZATION：一Biochem

8、istryandMolecularBiology。一——一一———————————-———I●___l-_-●___-●●_I____一POSTGRADUATE：WangChongMENTOR