乙酰肝素酶对脓毒症肾小球内皮细胞糖萼的影响-论文.pdf

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1、·524·中华肾脏病杂志2014年7月第30卷第7期ChinJDhr01，!Y2Q，Q!13Q，Q：!·基础研究·乙酰肝素酶对脓毒症肾小球内皮细胞糖萼的影响刘增波梅长林胡惠民王雪琦付莉莉【摘要】目的观察乙酰肝素酶对脓毒症肾小球内皮细胞糖萼的影响，并探讨其预防措施。方法C57BL／6小鼠给予脂多糖(LPS)或肿瘤坏死因子0【(TNF一01)腹腔注射，1h后处死，镧示踪后透射电镜观察肾小球内皮细胞糖萼变化，Western印迹检测肾皮质的乙酰肝素酶蛋白表达；人肾小球内皮细胞用TNF一作用1h，Western印迹

2、检测乙酰肝素酶的活化蛋白变化。小鼠注射LPS同时给予肝素钠和肝素酶Ⅲ，电镜观察肾小球内皮细胞糖萼的变化；留取小鼠24h尿液，检测各组尿白蛋白和尿肌酐，计算尿白蛋白一肌酐比值，进行比较。结果镧示踪透射电镜显示，LPS组和TNF一组。肾小球内皮细胞糖萼均降解，而足细胞糖萼完整。小鼠注射LPS后1h开始，肾皮质乙酰肝素酶蛋白表达显著增高(P<0．01)。TNF．仪刺激人肾小球内皮细胞后乙酰肝素酶活化增加(P<0．05)。小鼠注射LPS同时给予肝素钠抑制乙酰肝素酶，肾小球内皮细胞糖萼完整，尿白蛋白．肌酐比值显著低

3、于LPS组(P<0．05)；同时给予肝素酶Ⅲ使肾小球内皮细胞糖萼降解，尿蛋白一肌酐比值无改善，显著高于对照组(P<0．01)。结论脓毒症初期，TNF—使肾小球内皮细胞的乙酰肝素酶表达和活化增加，。肾小球内皮细胞糖萼降解，发生蛋白尿；抑制乙酰肝素酶能保护肾小球内皮细胞糖萼，减少尿蛋白。【关键词】脓毒症；肝素裂合酶；肾小球内皮细胞；糖萼；肝素ImpactofheparanaseonglomerularendotheliumglycocalyxduringsepsisLiuZengbo，MeiChanglin，

4、HuHuimin，WangXueqi，FuLili．DepartmentofNephrology,ChangzhengHospitalAfiliatedtoTheSecondMilitaryMedicalUniversity,KidneyResearchInstituteofPL4，Shanghai200003，ChinaCorrespondingauthor：MeiChanglin,Emaihchlmei1954@126．com【Abstract】ObjectiveToobservetheimpacto

5、fheparanaseonglomernlarendotheliumglycocalyxduringsepsisandtoinvestigatethepreventionofglycocalyxinjury．MethodsC57／BL6micewereinjectedwithlipopolysaccharide(LPS)ortumornecrosisfactor—cfTNF—)andsacrificedonehourlater．Glomerularendotheliumglycocalyxtracedwi

6、thlanthanumwasobservedbytransmissionelectronmicroscope(TEM)．Westernblottingwasusedtoobserveheparanseproteinexpressionofrenalcortextissue．HumanrenalglomerularendothelialcellsfHRGECs1werestimulatedwithTNF—o【andactiveheparanaseprotienexpressionwasdetectedbyW

7、esternblotting．Micewereadministratedwithheparinsodiumorheparinase11IandrenalendotheliumglycocalyxwasobservedbyTEM．Urineduringtwenty—fourhourswascollectedtomeasureurinaryalbuminandcreatinine．Theratioofalbumintocreatininewascalculatedandcomparedamonggroups．

8、ResultsTheglomerularendotheliumglycoealyxofLPSgroupandTNF一groupwasdegradatedandtheoneofpodocytewasintegrated．RenalcortextissueheparanaseproteinexpressionwassignificantlyincreasedsinceonehourafterLPSinjection<0．01)．T