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时间:2020-04-27
《ERK1/2通路介导硫化氢在人骨髓间质干细胞对抗顺铂诱导损伤中的作用-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华骨科杂志2014年3月第34卷第3期ChinJO~hoo,March2014.V01.34.N0.3·323··基础研究·ERK1/2通路介导硫化氢在人骨髓间质干细胞对抗顺铂诱导损伤中的作用郭海华黄纲李敬春冯鉴强雍碧城【摘要】目的探讨硫化氢在人骨髓间质干细胞(humanmarrowmesenchymalstemcells,HMMSCs)对抗顺铂诱导损伤中的作用及其机制。方法0、5、10、20、40、60、80mg/L/l~铂分别作用HMMSCs24h;20mg/LJIl~铂分别作用0、6、12、
2、24、36、48h;在20mg/LJl~.铂作用24h前分别用0、0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L的NaHS预处理30min;0.6mmol/L的NariS预处理30min前用ERK1/2通路抑制剂U0126处理30min或用激动剂人上皮生长因子共同预处理30min。检测细胞存活率、细胞凋亡率、磷酸化ERK1/2(p—ERK1/2)和总ERK1/2(t.ERK1/2)的表达。结果5、10、2O、4O、6O、80mg/LJIl~.铂作用后细胞存活率分别降至71.72%±2.72%、59.41
3、%±5.44%、50.37%±4.55%、38.97%±2.92%、30.11%±4.64%、21.71%±5.35%,与0mg/L组的差异有统计学意义;20mg/L顺铂作用不同时间后细胞存活率分别降至70.30%+6.20%、61.63%~2.70%、51.29%~3.13%、38.72%~3.66%、27.57%~2.32%,与0h组的差异有统计学意义;不同浓度NaHS预处理可使细胞存活率升高至65.99%±2.67%、72.93%~5.44%、75.10%~4.71%、76.56%+5.25%
4、,与顺铂处理组的差异有统计学意义;0.6mmol/L的NaHS预处理使细胞凋亡率从35.29%~2.77%下降至18.62%+0.97%;20mg/LJl~铂作用24h使p-ERK1/2表达下调,NaHS预处理可抑制顺铂对p-ERK1/2表达的抑制作用。应用U0126或人上皮生长因子分别抑制或促进了NaHS的保护作用及上调p-ERK1/2表达的作用。结论硫化氢预处理能通过激活HMMSCs的ERK1/2通路对抗顺铂诱导的细胞损伤。【关键词】MAP激酶信号系统;硫化氢;间质干细胞;顺铂;细胞保护ERK1
5、/2pathwaymediatestheprotectiveefectofhydrogensulfideagainstcisplatin-inducedinjuryinhumanmarrowmesenchymaistemcellsGaoHaihua,HuangGang,LiJingchun,FengJianqiang,YongBicheng.*DepartmentofOrthopaedicOncology,theFirstAfiliatedHospital,SunYat.senUniversity,
6、Guangzhou51DD8nChina【Abstract】ObjectiveToexploretheprotectionandmechanismofhydrogensulfide(H2S)preconditioningagainstinjuryinducedbycisplatininhumanmarowmesenchymalstemcellsfHMMSCs).MethodsHMMSCsweretreatedbycisplatinat0,5。10,2O,40,60,80mg/Lconcentrati
7、onsfor24hrespectivelyandwereexposedtocisplatinat20mg/Lconcentrationsfor0,6,12,24,36。48hrespectively.HMMSCswerepretreatedwithNartSat0,0.4,0.6,0.8,1.0mmol/Lrespectivelyfor30minbeforeex.posedtocisplatinat20mg/Lconcentrationsfor24h.HMMSCsweretreatedbyU0126
8、orcombinedwithhumanepidermalgrowthfactorfHEGF)togetherfor30minbeforetheywerepreconditionedwithNartSfor30min.Thecellsurvivalrate,cellapoptosisrate.theexpressionofP—ERK1/2andt.ERK1/2wererecorded.ResultsThecellSUrvivalratedecreasedto71.72%
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