顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用-论文.pdf

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1、566JournalofOralScienceResearch，Jun．2012，Vo1．28，No．6顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用白宇全海英张桐菲赵轩一张泽兵(吉林大学口腔医院病理科吉林长春130021)[摘要]目的：探讨顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用。方法：利用顺铂作用于口腔鳞癌Tca83细胞，不同时间后MTT法检测细胞生存率的变化，激光共聚焦显微镜观察细胞胞浆中自噬体的形成情况，AnnexinV—FITC流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果：顺铂作用于Tca83细胞2h即可出现明显的自噬性变化。细胞凋亡率随顺铂作用时间的延长而逐渐增加。结论：顺铂可

2、以诱导口腔鳞癌Tca83细胞发生自噬，过度激活的自噬作为细胞的一种死亡程序，可以与凋亡一起促进细胞死亡。[关键词]自噬顺铂口腔鳞癌细胞细胞死亡凋亡[中图分类号]R739．8[文献标识码]A[文章编号]1671—7651(2012)o6一O566一O4TheRoleofAutophagyInducedbyCisplatininOralSquamousCellCarcinomaTca83CellLine．BAIYu，QUANHai—ying，ZHANGTong一，eta1．DepartmentofPathology，StomatologyHospital，JilinUniversity，Ch

3、ang—chun130021[Abstract]Objective：ToinvestigatetheroleofautophagyinducedbycisplatininoralsquamouscellcarcinomaTca83cellline．Methods：Beingtreatedwithcisplatinatdifferenttime，Tca83cellssurvivalratewasexaminedbytetrazoliumbromide(MTT)colorimetry．AutophagosomeformationwasdetectedbyLaserscanningconfoc

4、aImicro—scope．Apoptosisratewascheckedbyfloweytometry．Results：Intheearly(2h)，autophagywasevidentafterthecellsweretreatedwithCisplatin．Apoptosisrateincreasedwiththeextendtimeofcisplatintreatment．Conclusion：CisplatincaninduceautophagyinTca83cellline，andoverativationautophagyasadeathprocedurecanpromo

5、tecelldeath．[-Keywords]AutophagyCisplatinOralsquamouscellcarcinomacellsCelldeathApoptosis自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象口]，取对数生长期细胞进行实验。顺铂(DDP，齐鲁制药随着研究的深入，人们发现自噬与肿瘤的发生、发展有限公司)用细胞培养液配置成100mg／I储存液关系密切，除了具有维持肿瘤细胞代谢平衡和内环一20℃保存，使用前稀释成所需浓度。MAP—LC3境稳定的作用，自噬还被称为Ⅱ型程序性细胞死亡一Ⅱ多克隆抗体购自美国Santacruse公司，FITC方式L2]。本实验为了研究自噬与口腔鳞

6、癌发生、标记的IgG和PI购自中杉金桥公司。发展的的关系，利用顺铂作用于口腔鳞癌Tca83细1．2细胞增殖活性检测(MTT法)取对数生长胞诱导产生自噬现象，探讨自噬在口腔鳞癌Tca83期的Tca83细胞，按每孔1×10个细胞接种于96细胞中的作用。孔细胞培养板，每孔加入200L细胞悬液，培养241材料与方法h后弃去上清液，每孔分别加入浓度为0．1、1、10、1．1细胞培养口腔鳞癌Tea83细胞(北京大学100rng／L的DDP溶液200L，每个浓度设3个复口腔医院惠赠)在含10％小牛血清的RPMI一1640孔，对照组加入等量的培养液，置37℃，5CO。孵培养基(含100U／mL青霉素和1

7、00mg／L链霉素)箱中，分别培养6、12、24、48h后每孑L加入2OL中，在37℃，59／6CO的饱和湿度的孵箱中培养。MTT(5mg／L)溶液，培养4h。弃上清，每孔加入每2d换液传代1次，使其保持对数生长状态，150肚L二甲基亚砜(DMS0)，室温下恒温水浴箱内振荡10min，于酶标仪检测各孔在波长490nm处基金项目吉林省科技厅科技引导项目资助课题(编号：201105101)的A值，计算细胞生存率。细胞生存率一实验组A作者