中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子克隆与分析.pdf

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1、2013钲河北大学学报(自然科学版)2013第33卷第2期JournalofHebeiUniversity(NaturalScienceEdition)Vol_33NO．2DOI：10．3969／j．issn．1000—1565．2013．02．012中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子克隆与分析谢松，李理想，陈宏健，孙玲玲，柳峰松(河北大学生命科学学院，河北省无脊椎动物系统学与应用实验室，河北保定071002)摘要：为了探明中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子表达调控机制，利用DNA步移法克隆了中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子及其上游调控序列，总长1100bp．分析表明，在基因转录起始位

2、点上游一30～一24bp~q：有1个TATAbox，未发现有CAATbox和GCbox．同时，在上游调控区还存在有多个可能影响启动子转录活性的顺式作用元件，如NF—KB，YY1和SP1等转录因子结合位点．这些结果为深入研究中国明对虾卵黄蛋白积累及卵子发生过程奠定了基础．关键词：卵黄蛋白原；DNA步移；启动子；顺式作用元件中图分类号：Q81文献标志码：A文章编号：1000—1565(2013)02—0175—06CloningandanalysisofthepromoterofFrOpnchinensisvitellogeningeneXlESong，LILixiang，CHE

3、NHongjian，SUNLingling，LIUFengsong(1．CollegeofLifeSciences，HebeiUniversity，Baoding071002，China；2．LaboratoryofInvertebrateSystematicsandApplicationofHebeiProvince，Baoding071002，China)Abstract：InordertoinvestigatethemechanismoftheexpressionandregulationoftheFenneropenae—USchinensisvitellogenin

4、gene，thepromoterandtheup—streamregulatoryfragmentof1100bpwereampli—fledbyGenomeWalkermethod．Analysisshowedthatthe“TATAbox”waslocatedat一30一一24bpinthefrontofthetranscriptioninitiationsite，butthe“CAATbox”and“GCbox”wereabsent．Meanwhile，amongtheupstreamregulatoryregion，therewereafewcis—actingele

5、mentswhichmightaffecttheactivityofpromoter，suchasNF—JcB，YY1，SP1，andSOon．TheseresultslaidthefoundationforUStostudytheaccumulationofthevitellinandtheoogenesisofFenneropenaeuschinensisindepth．Keywords：vitellogenin；GenomeWalker；promoter；cis—actingelement卵黄是甲壳动物胚胎发生及早期幼体发育的主要营养物质．胚胎和开口前幼体发育、生长所需

6、的能量和营养完全依赖卵黄．因此，卵黄含量和质量对于早期幼体维持生命是至关重要的．卵黄蛋白(vitellin，Vn)是一种高密度糖脂磷蛋白，是卵黄的主要成分．而卵黄蛋白原(vitellogenin，Vg)是Vn的前体，在肝胰腺或收稿日期：2012—12—15基金项目：河北省自然科学基金资助项目(C2010000256，C2011201027)；教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20101301120005)；河北大学自然科学基金资助项目(2011218)第一作者：谢松(1964一)，男，江西寻乌人，河北大学教授，主要从事甲壳类营养与发育研究．通信作者：柳峰松(197

7、6一)，男，河北任丘人，河北大学教授，从事无脊椎动物分子免疫学研究．E-mail：liufengsong@hbu．edu．cn河北大学学报(自然科学版)第33卷卵巢中合成，被卵母细胞摄取加工而成Vn．雌性动物卵黄生成期可大量合成Vg，而在其他生活时期和雄性动物体内的Vg含量却很低．但后来人们又发现，雄性动物和幼年动物在人工雌激素或低剂量的类雌激素长期作用下，都能诱导体内Vg的生成[1]．因此，通过检测雄性卵生动物体内Vg合成可以评价环境中的内分泌干扰化合物(endocrine—disrup—tingch