青虾卵黄蛋白原和卵黄蛋白原受体基因的克隆及功能研究

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1、分类号Ｓ９１７３〇１？学号聖ｌＬＱ＿為请農違义卷硕壬学位论文青虫下卵黄蛋白原和卵黄蛋白原受体基因的克隆及功能研究白鸿坤指导教师傅洪拓研究员专业名称水生生物学研究方向水产动物遗传育种答辩日期二〇—五年五月ＧＥＮＥＣＬＯＮＥ乂ＮＤＦＵＮＣＴＩＯＮＡＬＡＮＡＬＹＳ投ＯＦＶＩＴＥＬＬＯＧＥＮ旺ＮＡＮＤＶＩＴＥＬＬＯＧＥＮＩＮＲＥＣＥＰＴＯＲＩＮＭＡＣＲＯＢＲＡＣＨＩＵＭＮＩＰＰＯＮＥＮＳＥＢｙＢＡＩＨｏｎｇｋｕｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏ

2、ｒ．ＦＵＨｏｎｔｕｏ：ＰｒｏｆｇＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅ民ｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｑＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅｇＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＮａｎｊｉｎｇ，ＣｈｉｎａＭａｙ２０１５原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工。作所取得的成果除文中已

3、经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。＊兴／户学位论文作者（需亲笔）签名：台＾年（月｜日？＾＾学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留。并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印

4、或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。保密□＿＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名；＞０任年６月Ｉ日导师（需亲笔）签名；年月日＊Ｉ目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ一第章文献综述１一第节甲壳动物ｇＰ子发生相关基因研品１展１１．卵黄蛋白原和卵黄蛋白原受体基因１１．１卵黄蛋白原基因１１．２卵黄蛋白原受体基因４２．＼＆ｓａ基Ｓ８３．ＰＬ１０基因９４．Ｇｕｓｔａｖｕｓ基

5、因１０５１．周期蛋白家族基因０６．姐织蛋６酶家族１１７．热休克蛋Ｓ基０１２８．其它相关基０１２第二节本研巧的目的意义１４第二章青昕卵黃蛋白原基因的克隆１５、表达及功能研究一第节青奸卵黄蛋白原基因的克隆及序列分析１５１１．实验材料５１１．实验用昕１５１．２试剂１５１．３仪器１６２．实验方法１６２．１青虫下总ＲＮＡ臟取１６一２１．２青昕肝膜腺留ＲＮＡ第链ｃＤＮＡ的合成６２．３青昕Ｖ基因中间片段的获得及验证１７ｇＩ２．４ＰＣＲ产物的

6、克隆巧１８Ｊ序２ｃＤＮＡ全序２０．５青虫下Ｖｇ基因列的获得２．６生物信息学分析２１３．结果与分析２２３．１青师巧黄蛋白原基因＾ｃＤＮＡ序列结构特征２２３．２青昕Ｖｇ基因系统进化分析２６■４．讨沦２９第二节青邮卵黄蛋白原基因的时空表达分析３０１．实验材料３０１．１实验用奸３０１．２主要试剂３０１．３仪器３０２１．实验方法３２．１青化组织表达样品的采集３１２．２青奸卵巢不同发育时期样品采集３１２１．３青昕巧后发育样品的采集３２．４

7、组织ＲＮＡ的提取３１２一．５ｃＤＮＡ第链的合成３２ｇａ２＾．６青邮＼ｇ基因时空表达３２３．Ｓ震３３３巧．１青听各样品总ＲＮＡ的检测３－．２ＭｎＶｇ基因在胚胎、幼体３３、幼化不同发育时期中表达－３．３ＭｎＶｇ基因在成体不同姐织中的表达３４－細在卵巢不同发育时期中表达３．４ＭｎＶｇ３５？论４．Ｗ．３６４－．１ＭｎＶｇ基因在胚胎、幼体、幼邮不同发育时期中表达％４－．２ＭｎＶｇ在成体不同组织表达差异３７４－Ｖ．３Ｍｎｇ基因在卵巢不同发育时期

8、中表达ｙｊ第三节眼柄摘除和ＲＮＡｉ对卵黄蛋白原基因表达及性腺发育的影响３８１．材料与方法３８１．１实验用化３８１．２试剂３９１．３仪器巧２．实验方法３９２．１青奸Ｖｇ基因双链ＲＮＡ的准备巧２．２青奸Ｖｇ基因的干扰实验４１２．３青化眼柄摘除实验