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1、广东农业科学2012年第8期101非洲山毛豆种子凝集素性质的研究丘苑新,马永全,于新(仲恺农业工程学院轻丁与食品学院,广东广州510225)摘要:以非洲山毛豆种子为材料,通过热稳定性试验、酸碱稳定性试验、糖专一性试验及金属离子试验对其凝集素的性质进行研究。结果表明:当温度大于70℃,凝集素活性全部丧失;凝集素在pH5.8~9.1范围内具有凝集活性;凝集素的抑制糖主要是乳糖、蔗糖,而D一半乳糖、海藻糖和麦芽糖对其完全没有抑制效果;山毛豆种子凝集素凝集兔红细胞的活性依赖于Ca和Mg,Mn对山毛豆种子凝集素凝集兔红细胞的活性无影响。关键词:非洲山毛豆;种子:凝集索:凝集活性中图分类号:TS221文献
2、标识码:A文章编号:1004—874X(2012)08—0101—03StudyonlectinpropertiesofTephrosiavogeliiseedsQIUYuan—xin,MAYong—quan,YUXin(,JfIndustryandFoodScienceCollege,ZhongkcdUniversityofAgricultureandEngineering,Gucmgzhou510225,China)Abstract:Throughthethermalstabilitytest.acid—basestabilitytest.carbohydratespecificityte
3、standmetaljontesttostudytheTephrosiavogeliiseedslectinpropertiesinthispaper.Theresultsshowedthatlectinactivitytotallylossedwhenthetemperaturewasabove7OcC:thelectinhadagglutinatingactivitybetweenpH5.8~9.1:theinhibitioneffectonlectinofTephrosiavogeliiseedsweresugar1actoseandsucrose.D—galactose.trehalo
4、seandmahosedidnotperfectlyinhibitthelectin;theagglutinationof1ectinonredbloodcellofrabbitdependedonCaandMg2+.Mnhadnoeffectonagglutinationactivity.Keywords:Tephrosiavogelii;seeds;lectin;lectionactivity非洲山毛~(TephrosiavogeliiHookf1为豆科蝶形花缓冲溶液PBS(0.01mol/L,pH7.2,NaH2PO4一Na2HPO4,亚科灰叶属多年生灌木,原产非洲,主要分布于北纬15。
5、含0.15mol/LNaC1)、TBS(0.01mol/L,pH7.2,S—HC1.含至南纬20。的广大地区。目前其在国内种植主要用作保水0.15moULNaC1)。其他试剂均为国产分析纯。护坡、水土改良。非洲山毛豆种子产量大,富含凝集素等1.1.2仪器与设备D一37520高速冷冻离心机,German多种有生物活性的物质SigmaCentrifuge;JA5003A电子天平。上海精天电子仪器凝集素是一类多价的、非免疫来源的、对糖及其缀有限公司;PHS一25数显pH计,上海精密科学仪器有限合物高度专一识别的蛋白质lll。豆科植物凝集素具有刺公司;德国艾本德fEppendorf)单道移液器;200
6、3—10数激外周血淋巴细胞RNA合成和有丝分裂_2_、诱发人体外显恒温磁力搅拌器,国华电器有限公司:96孔V型血凝周血淋巴细胞产生抗癌淋巴因子、促进巨噬细胞的吞噬板,姜堰市荣飞器械厂作用、促使细胞凝集_3_和导致肿瘤细胞失活等生物学活1.2试验方法性。目前已分离得到许多在体外具有抗真菌活性的植物11凝集素的制备参照文献『5—61的方法,称取2g山毛凝集素,它们单独或协同作用,在植物抗真菌病害基因豆脱脂粉,加入两种缓冲液各40mL,10℃浸提16h,离心工程中发挥着重要作用l4]。目前尚无非洲山毛豆种子凝(4℃,5000r/min,15min)。沉淀用缓冲溶液浸提,冷室搅拌集素性质研究的文献报道
7、,为此我们研究其凝集素的性2~3h或在冰箱中过夜,再于4℃以3000r/rain离心15质,以期为非洲山毛豆中活性物质的研究和利用提供试min,合并上清液。取上清液分装到1.5mL离心管中再离验依据g,(12000r/min,20rain,4cl二)以除去微小试样颗粒.取上清液贮存于1.5mL离心管中,4℃保存待测。l材料与方法1.2.2热稳定性试验参照文献1的方法,将山毛豆种子1.1试验材料凝集
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