tgf-β1对绒毛膜癌jeg-3细胞基质金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶抑制剂-1蛋白表达的影响

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1、第20卷第2期河北医学Vo1．20，No．22014年2月HEBEIMEDIC1NEFeb．，2014文章编号：1006-6233(2014)02-0177—04TGF一对绒毛膜癌JEG一3细胞基质金属蛋白酶一9基质金属蛋白酶抑制剂-1蛋白表达的影晌‘胡亚涛，刘绍晨，许倩，李玉红卜，李晓茹(1．承德医学院，河北承德0670002．河北省承德市中心医院，河北承德067000)摘要：目的：观察转化生长因子一p1(transforminggrowthfactor-J3l，TGF-~1)对绒毛膜癌JEG-3细胞系基质金属蛋白酶一9(matrixmetalloproteinases，MMP

2、一9)、基质金属蛋白酶抑制剂一1(2"IMP一1)蛋白表达的影响。方法：体外培养人绒毛膜癌JEG一3细胞，分别给予不同浓度及不同作用时间的TGF-B1进行诱导，WesternBlotting法检测MMP一9、TIMP一1蛋白的表达变化。结果：与对照组相比，100、200g／LTGF-JB作用后，检测各组细胞MMP-9及TIMP一1蛋白的相对表达量均增加(P<0．01)；与Oh比较，12、24、48、72h各组细胞MMP一9及TIMP一1蛋白的相对表达量均增加(P

3、关键词：外淝L生TGF-~；绒癌JEG一3；MMP一9；T1MP—l；蛋白印迹法文献标识码：Bdo／：l0．3969／j．issn．1Oo6—6233．20l4．o2．oo1EfectofTransformingGrowthFactor一onMMP一9TIMP一1ProteinExpressioninJEG·-_3CellsHUYatao，LIUShaochen，XUQian，etal(ChengdeMedicalCollege，HebeiChengde067000。China)Abstract：Objective：Toinvestigatetheefectoftransform

4、inggrowthfactor—B1(TGF—p1)onmatrix-metalloproteinases(MMP一9)andTIMP一1proteinexpressioninJEG-3ceUs．Method：Thehumanchorio．carcinomacelllinecuhuredinvitrodifferentdosesofTGF—B1weregiventoJEG一3cellatdiferenttime．TheproteinexpressionofMMP一9andTIMP一1inducedbyTGF-~1wasmeasuredbyWesternBlotting．Re—su

5、it：TheproteinexpressionofMMP一9andTIMP一1increasedremarkedly，"afterinducingbyTGF-~1withlO0~g／Land2001xg／Lrespectively。(P<0．01)．Conclusion：Theinvasiveabilityandmetastasisofchofio—carcinomaJEG一3cellsiscloselyrelatedtotheexpressionofMMP一9andTIMP一1．Keywords：ExogenousTGF—pl；Choriocarcinoma；JEG一3；MMP

6、一9；T1MP一1；Westernblotting绒毛膜癌(简称绒癌)是细胞滋养细胞、合体滋养键步骤是细胞外基质(ExtraeellarMatrix，ECM)的降细胞和中间型滋养细胞混合增生的一种恶性肿瘤，具解，MMP-9／TIMP-1的平衡在降解ECM的过程中发有极强的侵袭性。越来越多的研究表明，TGF-B是挥极其重要的作用。本研究采用蛋白印记法(Western目前参与滋养细胞侵入调节最多的因子，在肿瘤细胞的侵入调节中发挥着重要作用。肿瘤浸润、转移的关Blotting，WB)检测分别给予不同浓度、不同作用时间河北省自然科学基金项目(项目编号：H2012406010)，河北省教育

7、厅课题资助项目(项目编号：2008303)通讯作者·l77·第20卷第2期河北医学VOI．20．No．22014年2月HEBEIMEDICINEFeb．，2014的TGF-13对JEG-3绒癌细胞MMP-9和TIMP一1蛋解20min，在4℃，12500转／min的离心力作用下离心白的表达情况，进一步分析MMP一9／TIMP一1在绒癌20min。上清液即为细胞总蛋白，按照BCA蛋白定量浸润、转移中的作用。试剂盒的操作流程确定其浓度。取适量总蛋白与5X1资料与方法SDS上样缓冲体系