基质金属蛋白酶14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因

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1、基质金属蛋白酶14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶14（matrixmetalloproteinase14,MMP14）和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer,EMMPRIN）在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,Rb）中的表达及其与临床病程的关系。方法用免疫组织化学SP法分别检测39例Rb中MMP14及EMMPRIN的表达；用LEICAIM50型全自动医学图像分析系统测量其平均灰度值，比较不同临床和病理阶段Rb中表达MMP14和EMMPRIN的

2、差异及二者阳性表达之间的关系。结果39例Rb中MMP14阳性表达34例，占87.18%；EMMPRIN阳性表达33例，占84.62%；青光眼期Rb中MMP14和EMMPRIN的表达明显高于眼内期（P＜0.01及P＜0.05），眼外期二者表达明显高于青光眼期（P＜0.01及P＜0.05）；视神经浸润组Rb中MMP14和EMMPRIN的表达明显高于无视神经浸润组（P＜0.01及P＜0.05）；Rb中MMP14和EMMPRIN的阳性表达水平呈密切相关（P＜0.01）。结论MMP14及EMMPRIN的表达水平可能与Rb的浸润转移有关，二者共同促进Rb的浸润转移。【关键词

3、】视网膜母细胞瘤；基质金属蛋白酶14；细胞外基质金属蛋白酶诱导因子；免疫组织化学　　　Toinvestigatetheexpressionsofmatrixmetalloproteinase14(MMP14)andextracellularmatrixmetalloproteinaseinducer(EMMPRIN)inretinoblastoma(Rb)andtherelationshipsbetordevelopment.MethodsImmunohistochemicaltechniqueinetheexpressionsofMMP14andEMMPRIN

4、in39casesofparaffinembeddedRbsamples.QuantitativeanalysisoftheexpressionsofMMP14andEMMPRINeasuringthemeangrayscaleofRbtissue.DifferencesoftheexpressionsofMMP14andEMMPRINineachclinicalandpathologicalstageesteporsoftheglauatousstagethanthoseintheintraocularstage(P＜0.01andP＜0.05),andthesam

5、econclusioncanbeconcludedbetorsa,Rb）起源于视网膜胚胎性核层细胞，是一种婴幼儿最常见的、危害性最大的眼内恶性肿瘤，可危及患儿的视力甚至生命。通常认为，Rb患儿的预后与视神经浸润与否、有无眶内及远处转移有密切关系。近年来的研究显示基质金属蛋白酶14（matrixmetalloproteinase14,MMP14）以及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer,EMMPRIN）在促进肿瘤的侵袭转移中发挥着重要作用［1］。本研究运用免疫组织化学法检测了MMP14

6、和EMMPRIN在视网膜母细胞瘤中的表达，分析其与临床病程的关系，探讨其在肿瘤浸润转移中的意义。　　1资料与方法　　1.1病历资料　　本实验所有石蜡包埋标本均来自山东省立医院眼科病理室自1988年～2005年间接受眼球摘除术的Rb患者，共39例，其中男16例，女23例。年龄3月～8岁，平均2.9岁。通过调阅病历及病理诊断书确定临床分期：眼内期22例，青光眼期11例，眼外扩展期6例，全身转移期0例；有视神经浸润18例，无视神经浸润21例；双眼发病1例。所有病例均经病理确诊。　　1.2主要试剂　　兔抗人MMP14单克隆抗体，工作浓度为1∶100；兔抗人EMMPRIN单克隆抗

7、体，工作浓度为1∶100，即用型SABC免疫组化染色试剂盒（包括生物素化羊抗兔IgG二抗、DAB显色剂、SABC），中性树胶均购自武汉博士德公司。　　1.3实验方法　　采用免疫组织化学法。具体步骤：石蜡标本行4?μm厚连续切片，脱蜡，梯度乙醇脱水，3%过氧化氢乙醇溶液孵育10?min,以灭活内源性过氧化氢酶,蒸馏水洗涤10?min；枸橼酸盐缓冲液内微波修复抗原，92?℃～98?℃,10?min，室温冷却，PBS洗涤3次；滴加5％BSA封闭液，室温20?min，不洗；滴加一抗（用PBS代替一抗为阴性对照），4?℃湿盒过夜，PBS