基质金属蛋白酶14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

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1、基质金属蛋白酶14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶14（matrixmetalloproteinase14,MMP14）和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer,EMMPRIN）在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,Rb）中的表达及其与临床病程的关系。方法用免疫组织化学SP法分别检测39例Rb中MMP14及EMMPRIN的表达；用LEICAIM

2、50型全自动医学图像分析系统测量其平均灰度值，比较不同临床和病理阶段Rb中表达MMP14和EMMPRIN的差异及二者阳性表达之间的关系。结果39例Rb中MMP14阳性表达34例，占87.18%；EMMPRIN阳性表达33例，占84.62%；青光眼期Rb中MMP14和EMMPRIN的表达明显高于眼内期（P＜0.01及P＜0.05），眼外期二者表达明显高于青光眼期（P＜0.01及P＜0.05）；视神经浸润组Rb中MMP14和EMMPRIN的表达明显高于无视神经浸润组（P＜0.01及P＜0.05

3、）；Rb中MMP14和EMMPRIN的阳性表达水平呈密切相关（P＜0.01）。结论MMP14及EMMPRIN的表达水平可能与Rb的浸润转移有关，二者共同促进Rb的浸润转移。【关键词】视网膜母细胞瘤；基质金属蛋白酶14；细胞外基质金属蛋白酶诱导因子；免疫组织化学　　　Toinvestigatetheexpressionsofmatrixmetalloproteinase14(MMP14)andextracellularmatrixmetalloproteinaseinducer(EMMP

4、RIN)inretinoblastoma(Rb)andtherelationshipsbetordevelopment.MethodsImmunohistochemicaltechniqueinetheexpressionsofMMP14andEMMPRINin39casesofparaffinembeddedRbsamples.QuantitativeanalysisoftheexpressionsofMMP14andEMMPRINeasuringthemeangrayscaleofRbti

5、ssue.DifferencesoftheexpressionsofMMP14andEMMPRINineachclinicalandpathologicalstageesteporsoftheglauatousstagethanthoseintheintraocularstage(P＜0.01andP＜0.05),andthesameconclusioncanbeconcludedbetorsa,Rb）起源于视网膜胚胎性核层细胞，是一种婴幼儿最常见的、危害性最大的眼内恶性肿瘤，可危及患儿的视力甚

6、至生命。通常认为，Rb患儿的预后与视神经浸润与否、有无眶内及远处转移有密切关系。近年来的研究显示基质金属蛋白酶14（matrixmetalloproteinase14,MMP14）以及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer,EMMPRIN）在促进肿瘤的侵袭转移中发挥着重要作用［1］。本研究运用免疫组织化学法检测了MMP14和EMMPRIN在视网膜母细胞瘤中的表达，分析其与临床病程的关系，探讨其在肿瘤浸润转移中的

7、意义。　　1资料与方法　　1.1病历资料　　本实验所有石蜡包埋标本均来自山东省立医院眼科病理室自1988年～2005年间接受眼球摘除术的Rb患者，共39例，其中男16例，女23例。年龄3月～8岁，平均2.9岁。通过调阅病历及病理诊断书确定临床分期：眼内期22例，青光眼期11例，眼外扩展期6例，全身转移期0例；有视神经浸润18例，无视神经浸润21例；双眼发病1例。所有病例均经病理确诊。　　1.2主要试剂　　兔抗人MMP14单克隆抗体，工作浓度为1∶100；兔抗人EMMPRIN单克隆抗体，工作浓度为

8、1∶100，即用型SABC免疫组化染色试剂盒（包括生物素化羊抗兔IgG二抗、DAB显色剂、SABC），中性树胶均购自武汉博士德公司。　　1.3实验方法　　采用免疫组织化学法。具体步骤：石蜡标本行4?μm厚连续切片，脱蜡，梯度乙醇脱水，3%过氧化氢乙醇溶液孵育10?min,以灭活内源性过氧化氢酶,蒸馏水洗涤10?min；枸橼酸盐缓冲液内微波修复抗原，92?℃～98?℃,10?min，室温冷却，PBS洗涤3次；滴加5％BSA封闭液，室温20?min，不洗；滴加一抗（用PBS代替一抗为阴