大肠腺癌中基质金属蛋白酶2、9及其抑制剂1、2的表达

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1、大肠腺癌中基质金属蛋白酶2、9及其抑制剂1、2的表达：陈谦，柯娟，王纪全，邓怀慈【摘要】目的探讨人大肠腺癌组织中基质金属蛋白酶2、9(MMP2、9)及其抑制剂1、2(TIMP1、2)的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测MMP2、MMP9和TIMP1、TIMP2在30例大肠腺癌组织及相应切缘正常组织中的蛋白表达。结果大肠腺癌组织中MMP2、MMP9及TIMP1的阳性表达明显高于正常切缘组织(P<0.05)，并与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期以

2、及淋巴结转移呈正相关(P<0.05);TIMP2在大肠腺癌组织中低表达(P<0.05)，并与浸润深度、Dukes分期以及淋巴结转移呈负相关(P<0.05)，与肿瘤分化程度无明显相关性(P>0.05);MMP9和TIMP1表达明显相关(r=0.4924,P<0.05)。结论MMP2、MMP9及TIMP1的过度表达与大肠腺癌的侵袭、转移有密切关系，其联合检测有助于评估大肠腺癌的恶性生物学行为及预后。【关键词】大肠癌;基质金属蛋白酶;组织金属蛋白酶抑制剂;免疫组织化

3、学　　ABSTRACT:ObjectiveTostudytheexpressionsofmatrixmetalloproteinase2(MMP2),matrixmetalloproteinase9(MMP9)andtheirinhibitors,tissueinhibitorofmetalloproteinaseTIMP1andTIMP2,inhumancolorectalcancerandtheirclinicalsignificance.MethodsTheexpressionsof

4、MMP2,MMP9,TIMP1andTIMP2in30primarycolorectaltumorsandadjacentnoncanceroustissuesmunohistochemicalSPmethod.ResultsThepositiveratesofMMP2,MMP9andTIMP1incolorectalcancerordifferentiation,Dukesstages,progressionofinvasiondepthandlymphnodemetastasis(P

5、<0.05).ThepositiverateofTIMP2uchlophnodemetastasis(P<0.05),butnottotumordifferentiation(P>0.05).Aclosecorrelationetastasisofcolorectalcancer,bineddetectionofaybehelpfulindeterminingthebiologicalbehaviorandprognosisofcolorectalcancer.　　KEYMPs)及

6、其抑制剂——组织金属蛋白酶抑制剂(tissueinhibitorofmetalloproteinases,TIMPs)共同维持细胞迁移和细胞外基质重建的动态平衡，其平衡失控是导致肿瘤细胞侵袭、转移的关键性事件[2]。本研究采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(streptavidin　　perioxidase,SP)法检测MMPs和TIMPs在大肠腺癌组织及癌旁正常组织中的表达,探讨其在大肠癌的发生、发展、侵袭和转移中的作用,以期为评估预后和治疗提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1标本标本选自西安

7、交通大学医学院第一附属医院2007年9月～2007年12月间手术切除后经病理证实的30例原发性大肠腺癌患者。其中男性20例，女性10例;年龄33～80岁，平均54.3岁;结肠癌20例，直肠癌10例;高中分化癌26例，低未分化癌4例;有淋巴结转移者16例，无淋巴结转移者14例。Dukes分期：A期+B期14例，C期+D期16例。同时取正常结、直肠组织30例(正常手术切缘组织，正常切缘距肿瘤边缘至少10cm)进行染色对照。　　1.2主要试剂兔MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2抗人多克隆

8、抗体及通用型SP免疫组化试剂盒、DAB试剂盒均购于北京中杉金桥生物技术有限公司。　　1.3方法采用免疫组化SP法。用已知阳性的乳腺癌组织切片作阳性对照,用PBS代替一抗作为阴性对照。　　1.4结果判断MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的阳性显色均为细胞质出现棕黄色颗粒。根据阳性目标积分吸光度值，将免疫组化染色程度分为，(-)：吸光度值≤5;(+)：5<吸光度值≤10;()：10<吸光度值≤15;()：吸光度值>15。