烟草苯丙烷代谢途径关键酶肉桂酸-4-羟化酶、4-香豆酸-辅酶A基因的分离及表达特性分析-论文.pdf

《烟草苯丙烷代谢途径关键酶肉桂酸-4-羟化酶、4-香豆酸-辅酶A基因的分离及表达特性分析-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、植物遗传资源学报2014，15(5)：1067—1073JournalofP1antGeneticResourcesDOI：10．13430／j．cnki．jpgr．2014．05．022烟草苯丙烷代谢途径关键酶肉桂酸．4．羟化酶、4．香豆酸．辅酶A基因的分离及表达特性分析于利，张彦，陈爱国，梁洪波，QamaruddinJogi，徐文玲，许娜(t中国农业科学院烟草研究所／农业部烟草生物学与加工重点实验室／中国农业科学院青岛烟草资源与环境野外科学观测试验l占／烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室，青岛26610

2、1；2中国农业科学院研究生院，北京100081；青岛农业大学农学与植物保护学院，青岛266109)摘要：肉桂酸一4．羟化酶(C4H)、4-香豆酸一辅酶A(4CL)是烟草苯丙烷代谢途径的关键酶，其多酚类产物与烟草品质密切相关本研究以酚类物质含量合成差异较大的2个烤烟品种红花大金元(HD)和K326为试验材料，利用同源克隆技术获得这2种烟草Nte4h和Nt4cZ基因的cDNA序列并进行表达特性分析。结果表明，在2个品种中Ntc4h和Nt4cl各有2个同源基因．Ntc4hl、Ntc4h2、Nt4cll和Nt4cl2

3、的ORF长度分别为1518bp、1518bp、1644bp和1629bp。Nt4cll、Ntc4hl和Ntc4h2在编码序列上存在品种间差异。实时荧光定量PCR分析结果表明，该2种酶的基因在烟草中具有明显的时空表达特异性，2种酶基因在根、茎、叶、花和萼片中都有表达，在茎的木质部和韧皮部中的表达量均显著高于其他组织；在圆顶期和适熟期表达水平较高．在适熟期达到最高：且两品种中的表达模式存在差异。关键词：烟草；肉桂酸一4羟化酶(C4H)；4一香豆酸一辅酶A(4CL)；基因分离；表达分析IsolationandExp

4、ressionAnalysisofNtc4handNt4clEncodingtheKeyEnzymesofPhenylalanineMetabolismPathwayinTobaccoYULi，ZHANGYan，CHENAi．guo，LIANGHong．bo，QamaruddinJogi，XUWen—ling，XUNa(TobaccoResearchInstituteofChineseAcademyofAgriculturalSciences~KeyLaboratoryofTobaccoBiologyandP

5、rocessing，Min~tryofAgriculture／QingdaoTobaccoResourcesandEnvironmentFieldStationofChineseAcademyofAgriculturalSciences／KeyLaboratoryofTobaccoGeneticImprovementandBiotechnology，Qingdao266101；GraduateSchoolofChineseAcademyofAgriculturalSciences，Belting100081；

6、CollegeofAgronomyandPlantProtection，QingdaoAgriculturalUniversity，Qingdao266109)Abstract：Cinnamicacid一4一hydroxylase(C4H)andp-coumaricacid·4一ligase(4CL)arethekeyenzymesinphenylpropanoidmetabolicpathway，whosepolyphenolproductsarecorrespondingtothequalityoftob

7、accos．Inthestudy，cDNAsofthesetwoenzymeswereobtainedusinghomology—basedcloningfromvarietyhonghuadajinyuan(HD)andvarietyK326，whosequantityofpolyphenolproductsdifferedsignificantlyandtheirexpressionprofileswereanalyzedbyrealtimeqRT—PCR．TheresultsshowedthatNtc4

8、handNt4clbothhadtwohomologousgenes．TheORFlengthofNtc4hl，Ntc4h2，Nt4cll，andNt4cl2wasl518bp，1518bp，1644bp，and1629bp，respectively．Ac-cordingtotheanalysis，Ntc4hl，Nt4cll，andNtc4h2showeddifferentcodingsequenc