大豆蛋白的酶水解及类蛋白反应对其抗氧化活性的影响.pdf

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时间:2020-03-26

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1、管理创新大豆蛋白的酶水解及类蛋白反应对其抗氧化活性的影响张向挺(东北农业大学理学院应用化学系黑龙江省哈尔滨市150030)摘要:根据调查研究表明,生物体一旦被氧化,则会导致细胞酸溶液,提取2.5ml的上清液,加入2.5ml的蒸馏水和0.5ml的氯的死亡以及组织的损害,生物体氧化是导致人类衰老的重要因化铁溶液,均匀进行混合。在反应10分钟后,测定吸光度,并根素。人类为了防止衰老以及预防一系列的慢性疾病,利用大豆蛋据实验的结果来测定其还原力,吸光度越大表明了还原能力越白的酶水解方法研制出一种生物的活性肽,用来调节生理平衡。强。活性肽之所以能调节身体

2、平衡,在于其内部氨基酸的组成和排二、结果与分析列,可以表现出一种活性——抗氧化性。基于此,本文将通过实1.大豆蛋白水解物制备验的方法,分析大豆蛋白的酶水解方法以及抗氧化活性的影响,根据实验结果表明,大豆蛋白的水解物的抗氧化性会随着水并总结出如何在实际中得以应用。解度的增大而增大,水解时间越长,则水解度越高,对连氮的清除关键词:大豆蛋白水解物;类蛋白反应;抗氧化活性率也就越明显。但如果水解时间延长的话,连氮清除率却没有显著性的提高。前言:2.类蛋白反应条件的优化大豆蛋白的类蛋白反映有利于催化蛋白质酶水解的逆过程,利用蛋白酶等成分对所制备的大豆蛋白

3、的水解物进行类蛋其原理就是由较低的分子质量的肽所形成一种类似与蛋白质的白反应,设定一个反应的时间进行实验,并根据实际的需要来分混合物体,在实验的反应过程中受到水解作用、缩合作用、转肽作析出酶添加量、底物浓度和温度对修饰产物游离氨基减少量的影用以及物理聚集作用的影响,而最终形成新结构的肽,这种转化响。过程影响了其生物学的活性。化学研究者通过精心钻研后得出最后以类蛋白反应后的产物游离氨基减少量当成一个指标,结论:醋蛋白的水解物的类蛋白反应能对其抗氧化反应起到推动利用方程式求解的方式,得到最终的类蛋白反应最优条件[2]。作用。为了验证这项结论,本文将

4、通过实验的方法,深入研究大3.得出实验结论豆蛋白的酶水解以及随后的类蛋白反应对其抗氧化活性的影响。通过该实验,可以看出大豆蛋白的水解物、修饰产物的抗氧一、材料和方法化活性要远远高于大豆蛋白本身,类蛋白反应也能显著提高大豆1.材料与试剂蛋白水解物的修饰产物中的抗氧化活性。因此可以得出实验结在做这项实验之前,共准备了材料:大豆分离蛋白、蛋白酶、论:大豆蛋白的蛋白酶水解、类蛋白的反应修饰,能够应用与制备二苯基、三硝基苯肼、连氮、铁氰化钾、邻二氮菲、邻苯三酚、其他高活性的大豆蛋白抗氧化肽的研究。试剂以及蒸馏水。三、抗氧化活性肽的作用机理2.仪器与设备自

5、由基是独立存在的一种化学形式,化学性质及其活泼。自为了更加准确分析实验结果,还需要准备紫外—可见分光光由基在通常情况下可以攻击生命体内的大分子物质和细胞壁,造度计、自动凯氏定氮仪、高速冷冻离心机、真空冷冻干燥机、全温成机体本身的多种损伤,加速机体的老化。当处于正常的生理条振荡培养箱、精密PH计、分析天平、微型旋涡混合器远红外恒温件下,机体中的自由基可以达到一个产生与自动清除相互平衡的干燥箱、电热恒温水浴锅等设备。状态下,但一旦机体处于不良的状态,并随着人类年龄的增长,机3.实验方法体中的自由基就会大量生产并且清楚缓慢[3]。针对这样的现象,(1

6、)碱性蛋白酶大豆蛋白水解物人们研制出一种人为的自由基清除剂,又被称之为抗氧化剂,能首先需要配制出来浓度为100mg/ml的大豆分离蛋白的液够有效清除机体当中多余的自由基,减轻其对机体的损害。体,并通过2mol/NaOH的溶液使之调整到PH值到8左右,并添根据目前的实际情况来看,已有的抗氧化剂一般条件下会通加1000U/g的蛋白酶,在50℃的恒温水浴中进行酶解实验。根过五种途径来达到抗氧化的目的:抑制脂质过氧化反应、直接清据不同的水解时间分别取出20ml的样品,再将浴中的水迅速升除活性氧自由基、清除氧、螯合金属离子以及激活体内本身自带温到100℃

7、加热15分钟,待到室温冷却后调节PH值到4.5并分的抗氧化防御系统。抗氧化剂主要来源于蛋白酶的水分解物,其离出上清液。通过这些蛋清液测试出水解度[1]。根据测试出来的可以有效抑制机体内自由基的过量积累,对清除体内的自由基有结果,确定出合适的水解时间,并放大刚刚分解出的大豆蛋白水着十分显著的功效。解物,冷冻干燥后备用。结论(2)三硝基苯肼自由基的清除能力测试人类许多的慢性病以及衰老的现象发生均来源于人机体内这项实验的具体步骤为:提取三硝基苯肼0.0079g,用无水乙的自由基失衡,积累了过量的自由基会对人体细胞造成严重的损醇对其加以溶解,最后定容到

8、100ml,所配制出的溶液就是乙醇伤。为了改善这种现象,人们通过蛋白酶的抗氧化剂来帮助人们溶液,放到棕色瓶内并在不受阳光照射的条件下保存。同时提取维持

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