微生物培养练习.doc

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1、I.(10分)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤屮筛选出能高效降解原汕的菌株。冋答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一確源的固体培养基上，从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和o(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力(4)通常情况下，在微生物培养过稈屮，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在洒精灯附近进行，以避免周围环境屮微生物的污染。［答案］(1)

2、原汕选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸气灭菌火焰2.(10分)(2013•东北三校一模)现在大力提侣无纸化办公，但是仍然不可避免的每年要产生大最的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醉。下图是T业上利用微生物用纤维素生产乙醉的基木工作流程，请I叫答相关问题。(1)白然界屮①环节需要的微生物大多分布在的环境屮。将从土壤屮获得的微生物培养在以为碳源、并加入的培养基上筛选周围有的菌落。(2)如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液屮酶蛋白浓度相同

3、，则你认为三种酶液的活性(一定相同、不一定相同、一定不同)，可以通过进行定量测定。(3)根据测定结果，①环节常选择毛霉，则②屮获得的酶是酶。该酶至少包括三个组分。(4)生产屮可以满足④环节的常见菌种是,为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意,④过程要注意避免o(5)该技术虽然有广阔的前景，但存在酶的成木高等问题，为了降低成木主要从以下几方血入手改进该过稈。首先要通过一等技术手段对产酶微生物改造，提高酶的产量。其次，可利用等技术使酶能够重复利用。［答案］(1)富含纤维素(其他合理答案也可，如落叶较多等)纤维索刚果红透明圈(2)不一定相同对

4、纤维素酶催化纤维素分解后所产生的葡萄糖(3)纤维素G酶、Cx酶、匍萄糖廿酶(4)酵母菌发酵装置密闭(或保证无氧条件等)杂菌污染(5)基因工稈(基因突变)固定化酶2.(10分)生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定了知识基础和能力基础。请冋答下列有关生物技术实践屮的问题。(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有灭菌、干热灭菌和灭菌。(2)在果醋、泡菜的制作过程屮，需要氧气的是；在制作果醋过程屮，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是o⑶血红蛋白的提取和分离的实验中，在洗脱过程中加入物质的最浓

5、度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pll为7.0)的甘的是o如果红色区带,说明色谱柱制作成功。(3)进行菊花组织培养的基木实验操作步骤是：制备MS間体培养基、、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择合适发冇时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发冇时期最常用的染色方法是。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基屮(4)橘皮精油的提取Z所以不采取水蒸气蒸催法，是因为水屮蒸憎会导致原料和有效成分等问题。［答案］(1)灼烧高压蒸汽(2)果醋用果胶酶处理(3)准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致均匀一致的移动

6、(4)外植体消毒醋酸洋红法激索的种类及其浓度配比(5)焦糊水解3.自然界屮的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数最的测定。下面是对大肠杆菌进行数最测定的实验，请冋答有关问题。实验步骤：⑴制备稀释倍数为诃、10'、101010°的系列稀释液。(2)为了得到更加准确的结果，你选用法接种样品。(3)适宜温度下培养。结果分析：(1)测定大肠杆菌数目时，，在对应稀聲倍数为1(/的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是,其理由是oA.一个平板，B.两个平板，C.三个平板，D.四个平板，统计的菌落数

7、是230统计的菌落数是220和260,取平均值240统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250(2)—同学在稀释倍数为10’的培养基屮测得平板上菌落数的平均值为234,那么毎毫升样品屮的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.ImL)。(1)用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量,因为解析：木题考查微化物的计数方法，可从两种接种方法的优缺点和统计菌落数日时应注迂的问题入手解答该题。为了得到更加准确的结果，应用稀釋涂布平板法接种样品。（1）

8、选取多个菌落数相差不人的平板计数,取其平均值。（2）2344-0.IX10培养基屮加入尿素的目的是筛选，这种培养基属于培养基。“目的菌”生长所需的氮源和確源分别来自培养基屮的和，实验屮需要振荡培养，原因是o转入固体培养基时，常采用接种