资源描述：
《大豆异黄酮苷元检测方法的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、大豆异黄酮昔元检测方法的研究作者：张磊,金桂芳，杨红，习志刚【摘要】冃的建立大豆异黄酮昔元含量测定方法。方法采用HPLC法，DiamonsilC18柱（250mmX4.6mm,5um）,流动相：甲醇・0.3%磷酸溶液（体积比48:52）,流速0.7mUmin,测定波长260nm,柱温25°C。结果制备的大豆异黄酮昔元总含量为70.98%;大豆昔元、黄豆黄索和染料木索平均冋收率分别为98.7%、98.9嚇口99.2%,RSD分别为21%、1.6%?H1.4%。结论所建立的测定方法重现性好、可靠，可用于3种大豆异黄酮背元的含量测定。【关键词】大豆异黄酮昔元；高效液相色谱法；含量测定Abst
2、ract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodforthecontentdeterminationofisoflavoneaglyconesMethodsIsoflavoneaglyconeswereanalyzedonqDiamonsilC18column（250mmX4.6mm,5um）.AmixtureofMeOH-0.3%H3PO4（48:52）wasusedasthemobilephasewithaflowrateof0.7mL/min.Thedetectingwavelengthwas260nmat25°C.ResultsThecontentof
3、isoflavoneaglyconesinthesamplewas70.98%.Theaveragerecoveriesofgenistein,daidzeinandglyciteinwere99.2%,98.7%and98.9%withRSD1.4%,2.1%and1.6%,respectively.ConclusionsThismethodcanbeusedforthequalitycontrolofsoyisoflavoneaglyconesKeywords:soy;isoflavoneaglycones；HPLC大豆异黄酮有广泛的生理活性，具有抗氧化、防癌和抗癌、预防骨质疏松症
4、、保护心血管系统和神经保护等作用。有资料表明，在哺乳动物体内，去除糖基配体后形成的大豆黄酮昔元及其代谢产物均是弱雌激素样活性物质,昔元比糖昔更容易被人体吸收［1,2］。大豆异黄酮昔元广泛用于保健品、食品和化妆品等，正受到广泛的关注，因此建立一个稳定、准确的含量检测方法有重要的应用价值。1仪器与材料DionexP680A高效液相色谱仪，数显恒温水浴锅（江苏省宏华仪器厂），旋转蒸发器（上海亚荣仪器厂），SH2-D循环水真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司），电子天平（Sartorius）。染料木素、大豆昔元和黄豆黄素对照品（购于上海同田生化技术有限公司,纯度均299%）,脱脂豆粕（购于山西省
5、曲沃县），AB-8大孔树脂（南开大学化工厂），聚酰胺（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；甲醇（色谱纯，英国1HDIA公司），屈臣氏蒸憎水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1大豆异黃酮昔元的制备取豆粕适量，用8倍量（g/mL）体积分数为70%的乙醇溶液浸泡30min,80°C水浴冋流提取2次，每次90min；合并提取液，过滤后回收乙醇、浓缩；上AB8大孔树脂,以体积分数为50%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，45°C烘干。适量乙醇溶液溶解，拌样丄聚酰胺柱，以体积分数为70%的乙醇溶液洗脱，得粗提浸膏，45°C烘干。取一定量的粗提物置于圆底烧瓶屮，加入4倍量（g/mL）的7%盐酸■乙
6、醇液，80°C水浴水解2h,浓缩，乙隴萃取，挥干乙瞇；用适量体积分数为70%的乙醇溶液溶解，石油龊脱脂，用200〜300FI硅胶拌匀，自然干燥，上硅胶柱，用三氯甲烷■甲醇（体积比6：1）洗脱，收集洗脱液，挥去溶剂，得大豆异黄酮昔元混合物［3,4］。2.2样品溶液的制备精密称取大豆界黄酮昔元混合物28.50mg,置50mL量瓶屮，加甲醇超声溶解，定容，精密吸取1.0mL置10mL量瓶屮，加甲醇至刻度，摇匀，得质量浓度为0.0570mg/mL的样品溶液。2.3对照品溶液的制备分别精密称定大豆甘元、染料木素对照品13.20mg.14.60mg各置50mL量瓶屮，加甲醇超声溶解，定容，得浓度为
7、0.2640mg/mL的大豆昔元及0.2920mg/mL的染料木素对照站溶液；精密称定黄豆黄素27.75mg,置50mL量瓶小，加甲醇超声溶解，定容，精密吸取1.0mL,至5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得0.1110mg/mL的黄豆黄素对照品溶液。4°C储存备用。2.4色谱条件［5〜6］DiamonsilC18柱（250mmX4.6mm,5um）；柱温25°C；流动相：甲醇03%磷酸溶液（体积比48：52）；流速=0.7mL/min；测定
