研究大豆异黄酮苷元含量的检测方法-论文.pdf

《研究大豆异黄酮苷元含量的检测方法-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ChinascienceandTechnologyReview研究大豆异黄酮苷元含量的检测方法赛晓鹏(哈药集团世一堂制药厂)[摘要]目的建立大豆异黄酮苷元含量测定方法。方法采)~HPLC法，DiamonsfiC18柱(250mmx4．6mm，5¨m)，流动相：甲醇一0．3％磷酸溶液(体积1：~48：52)，流速O．7mL／min，测定波长260rim，柱温25"(3。结果制备的大豆异黄酮苷元总含量为70．98％；大豆营元、黄豆黄素和染料木素平均回收率分别为98．7％、98．9％和99．2％，RSD分别为2．1％、1．6％和1．4％。结论所建立的测定方法重现性好、可靠，可用于3

2、种大豆异黄酮苷元的含量测定。[关键词]大豆异黄酮苷元；高效液相色谱法；含量测定中图分类号：O652．63文献标识码：A文章编号：1009-914X(2013)21—0014—01大豆异黄酮有广泛的生理活性，具有抗氧化、防癌和抗癌、预防骨质疏松y=5836．1x+O．8812，r=0．9994；症、保护心血管系统和神经保护等作用。有资料表明，在哺乳动物体内，去除糖y=l177．4x+0．1372，r=0．9994I基配体后形成的大豆黄酮苷元及其代谢产物均是弱雌激素样活性物质，昔元比y=3256．6x+0．894，r=0．9992。糖苷更容易被人体吸收。大豆异黄酮苷元广泛用于保健

3、品、食品和化妆品等，正大豆苷元、黄豆黄素和染料木素分别在2．112～21．12ug／mL，O．666受到广泛的关注，因此建立一个稳定、准确的含量检测方法有重要的应用价值。0-6．660ug／mL，4．380-43-80g／mL范围内，线性关系良好。1仪器与材料2．6精密度试验DionexP680A高效液相色谱仪，数显恒温水浴锅(江苏省宏华仪器厂)，取对照品溶液Ⅲ，重复进样6次，记录色谱图，测定峰面积值，计算RSD~，旋转蒸发器(上海亚荣仪器厂)，SH2一D循环水真空泵(巩义市予华仪器有限责得大豆营元、黄豆黄素和染料木素的RSD分别为0．59％、0．62％和0．83％。任公司)

4、，电子天平(Sartorius)。2．7重复性试验染料木素、大豆苷元和黄豆黄素对照品。{句于上海同田生化技术有限公司，取同一批次大豆异黄酮苷元混合物6份，按“2．2”项下，制备样品溶液，测定纯度均≥99％)，脱脂豆粕(购于山西省曲沃县)，AB-8大孔树脂(南开大学化工峰面积值，计算R‘；D值，得大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的RSD~I]为2．o％，厂)，聚酰胺(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)，甲醇(色谱纯，英国TEDIA公1．2％和1．4％。司)，屈臣氏蒸馏水，其余试剂均为分析纯2．8稳定性试验2方法与结果取同一样品溶液分别在0、2、4、6、8、12h于上述色谱条件下测定峰

5、面积值，2．1大豆异黄酮苷元的制备计算R{；D值，得大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的RsD分别为0．7o％、1．和0．取豆粕适量，用8倍量(g／mL)体积分数为70％的乙醇溶液浸泡30min，8074％。℃水浴回流提取2次，每次90rain；合并提取液，过滤后回收乙醇、浓缩；上AB一2．9回收率试验8大孔树脂，以体积分数为50％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，45"C烘干取大豆异黄酮昔元混合物6份，精密称定，分别准确加入3种对照品溶液各适量乙醇溶液溶解，拌样上聚酰胺柱，以体积分数为700／0的乙醇溶液洗脱，得粗适量，余同“2．2项下操作。分别计算得大豆苷元、黄豆黄素和染料木素

6、平均回提浸膏，45℃烘干。取一定量的粗提物置于圆底烧瓶中，加入4倍量(g／mL)的收率，结果表明，3种苷元回收率均符合要求。7％盐酸一乙醇液，80"C水浴水解2h，浓缩，乙醚萃取，挥干乙醚；用适量体积分数2．10大豆异黄酮苷元含量测定为70％的乙醇溶液溶解，石油醚脱脂，用2oo～3oo1~硅胶拌匀，自然干燥，上硅精密吸取样品溶液(0．171mg／mL)，测定3次，结果见表，样品中3种苷元胶柱，用三氯甲烷一甲醇(体积E匕6：1)洗脱，收集洗脱液，挥去溶剂，得大豆异黄总质量分数为70．98％，样品HPLC图见图。酮苷元混合物。3讨论2：2样品溶液的制备大豆中异黄酮存在的形式主要是

7、结合型的糖苷，其含量占大豆中异黄酮含精密称取大豆异黄酮苷元混合物28．50mg，置5(knLt瓶中，加甲醇超声溶量的95％以上，虽然游离的营元含量不足5％，但它们表现出来的活性要比结合解，定容，精密吸取1．0mL置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得质量浓度为型的糖苷高得多。在用水解法制备大豆异黄酮苷元时，常用酶、碱和酸法水解。0．0570mg／mL的样品溶液。酶水解条件要求高、成本高，碱性条件水解得到异黄酮苷元不稳定，容易降解，23对照品溶液的制备本试验用酸水解，而常用强酸中，硫酸、硝酸有氧化性，可