尿素氮测定的标准操作规程.doc

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1、尿素氮测定（速率法）1：概述尿素是人体内蛋白氮代谢的终产物，它构成了血液中绝大部分的非蛋白氮。尿素产生于肝脏，经过肾脏排泄至尿中，因此尿素的含量取决于蛋白质的摄入量，蛋白质分解代谢和肾功能。2：标本的手收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用

2、血浆标本。3方法原理样品中的尿素在试剂中脲酶的催化下与水反应生成氨和二氧化碳，生成的氨与试剂中的酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下产生谷氨酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降。通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可计算出样品中尿素的浓度。4剂来源，配置及储存试剂来源：试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效

3、期。5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪6计算方法ALT(U/L)=(A/min*Tv*1000)(6.3*Sv*P)式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径（cm）7线性范围：本实验的线性范围：0----35mmol/L8参考范围：2.82---8.2mmol/L9失控控理1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变

4、质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。10注意事项1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。2：如测试结果超出线性范

5、围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。4：高血脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸光度值。这类样本的高值ALT耗尽底物后，在340nm处仍维持较高的吸光度值，此时样本应稀释后在进行测定。5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。11:临床意义　血尿素氮增高：（1）肾性增高见于急性肾炎、慢性肾炎、中毒性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾血管硬化症、先天性多囊肾和肾肿瘤等引起的肾功能障碍。　血尿素氮高，尤其对尿毒症的诊断有特殊价值，其增高程

6、度与病情严重性成正比，如肾功能不全氮质血症期血尿素氮超过9mmol/L，至尿毒症期B血尿素氮（BUN）可超过20mmol/L，有助于病情的估计。（2）肾前性增高见于充血性心力衰竭、重度烧伤、休克、消化道大出血、脱水、严重感染、糖尿病酸中毒、肾上腺皮质功能减退、肝肾综合征等。　（3）肾后性增高见于因尿路梗阻增加肾组织压力，使肾小球滤过压降低时，如前列腺肥大、肿瘤压迫所致的尿道梗阻或两侧输尿管结石等。　血尿素氮降低：　血尿素氮低对于临床诊断意义较小，偶见于急性肝萎缩、中毒性肝炎、类脂质肾病等