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1、尿素氮测定版本号:页码:第页共页1检测原理尿素酶能特异性地水解尿素为氨和二氧化碳。所生成的氨被谷氨酸脱氢酶(GLDH)利用以使酮戊二酸(a-KG)发生还原性氨化,同吋使烟碱-腺卩票吟二核昔酸(NADH)氧化。由于NADH的消失而发生的在340nm波长上吸光率的变化与样本屮的BUN浓度成止比。尿素+H20尿素酶2MH3+C02ANib+a-KG+NADHGLDHL-谷氨酸盐+NAD>2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存,及时送检。尿素易于被细菌降解,血清和尿液样品在分析前放置在4〜8°C。2.3注意事项
2、推荐选用血清。在测定过程中,各种器材和蒸馆水应无氨离子污染,否则结果偏高。标本不能使用氟化物和肝素钱抗凝剂,因氟化物有抑制腺酶的作用。标本应避免乳糜、脂血、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~3孔为a-KG4.69mmol/L,NADH0.34mmol/L,尿素酶6.8U/mL,激活剂,稳定剂,片剂;4〜6孔为GLDH2.0U/mL,稳定剂,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2-8°C保存,有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。
3、3.3校准品西门子校准品。3.4仪器尿素氮测定版本号:页码:第页共页SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。3.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。2.3标本处理以2500-3000r/min,离心6〜lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8°C保存。4.4标本检测2.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位
4、置号,按enter,在PatientName处选择性输入病人名字,按enter,在SampleNo处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXTMODE选择样品管类型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID选择标木类型)。2.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。4.4.4
5、检验后标本保存标本检验完成后用釆血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸懈水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。3.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。3.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL-F1:CALIBRATION,按enter-F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号Cali
6、bratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGNCUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN-F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序尿素氮测定版本号:页码:第页共页2.1质控品准备和储存质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10〜・70°C可保存到瓶身有效期,未开启2-8°C可保存90d,开启后2~8°C可保存30d。2.2质控水平和分析批长度每24小至少进行--批
7、,每批2个浓度水平。4.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范圉为0〜53.5mmol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间血清:2.5〜6.4mmol/L尿液:249-714mmol/24小时。9临床意义血清尿素氮增高:见于①肾前性氮质血症,rh于肾血流量灌注减少或者尿素生成过多引起。后者见于高蛋白饮食、饥饿、发热、脓毒血症所致的蛋白质分解代谢增加以及胃肠道出血后血液蛋白吸收等。脱水、休克、心衰
8、引起的肾供血不足,亦可使血液尿素氮升高。肾前性氮质血症,肌酹浓度往往不伴随升高。②肾性氮质血症,由于急性与慢性肾功能衰竭、肾小肾炎、肾盂