实验二:实验室环境和人体表面微生物的检查.ppt

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1、实验室环境和人体表面 微生物的检查一、实验目的要求掌握倒平板的方法;证明实验室环境与体表存在微生物;比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型;观察不同类群微生物的菌落形态特征;体会无菌操作的重要性。二、基本原理平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在适宜温度下培养1-2d内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体的集落,称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小,表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明或半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等

2、。因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。三、实验器材1.培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂平板。2.仪器或其他用具:无菌水、灭菌棉签、接种环、试管架、酒精灯、记号笔,废物缸。四、操作步骤l.倒平板2.写标签用记号笔将器皿做上记号,写上班级、姓名、日期,样品来源,字写在皿底的一边,以免影响观察结果。培养皿的记号一般写在皿底上。如果写在皿盖上,同时观察两个以上培养皿的结果,打开皿盖时,容易混淆。3.实验室细菌检查(1)空气(2皿)——实验室和无菌室(2)实验台和门的旋钮(3皿)(3)对照(1皿)——什么也不接种4.人体细菌的检查(1)手指(洗手前与洗手后)(

3、2皿))(2)头发(1皿)(3)咳嗽(1皿)(4)鼻腔(1皿)(5)对照(1皿)5.将琼脂平板翻转,使皿底朝上,放于37℃培养箱,培养1-2d。5.结果记录方法(1)菌落计数在划线的平板上,如果菌落很多而重叠,则数平板最后1/4面积内的菌落数。不是划线的平板,也一分为四,数l/4面积的菌落数。(2)根据菌落大小、形状、高度、干湿等特征观察不同的菌落类型。但要注意要选择分离得很开的单个菌落。菌落特征描写方法:①大小大、中、小、针尖状。②颜色黄色、灰色、乳白色、红色、粉红色等。③干湿情况干燥、湿润、粘稠。④形态圆形、不规则等。⑤高度扁平、隆起、凹下。⑥透明程度

4、透明、半透明、不透明。⑦边缘整齐、不整齐。样品来源菌落数菌落类型特征描写大小形态干湿高度透明度颜色边缘11232123五、实验报告思考题比较各种来源的样品,哪一种样品的平板菌落数与菌落类型最多?人多的实验室与无菌室(或无人走动的实验室)相比,平板上的菌落数与菌落类型有什么区别?你能解释一下造成这种区别的原因吗?洗手前后的手指平板,菌落数有无区别?通过本次实验,在防止培养物的污染与防止细菌的扩散方面你学到些什么?有什么体会。

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