实验环境和人体表面微生物检查

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1、实验环境和人体表面微生物检查班级：生命科学院00级姓名：00学号：000000000000同组人：00【实验目的】1•证实实验环境与人体表面有微生物；2.体会无菌操作的重要性；3•观察不同类群微生物的菌落形态特征。【实验原理】如何使我们周围的微生物从“看不见”变得“看得见”呢？通过放大微生物个体，是我们能看见它们；另一种方法是通过“放大”菌落，是我们看到他们的存在。即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌聚集在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落,来检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢

2、固树立无菌概念。平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，每一菌体可以通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此可以通过平板培养基来检查环境中细菌的数量和类型。【实验器材】配培养基：牛肉膏蛋白腺琼脂平板；仪器及其他用品：酒精灯、500ml量筒、500ml锥形瓶、试管2、培养皿20、记号笔、火柴

3、等。【实验内容】1・灭菌：高温蒸汽灭菌。将锥形瓶用棉塞塞好、牛皮纸包好，培养1111十个一组包好，两只试管内装半管水，用棉塞塞好并用牛皮纸包好放入指定仪器中灭菌。2•倒平板右手持盛培养基的锥形瓶置酒精灯火焰旁边，用左手将瓶塞轻轻拔岀,瓶口保持对着火焰；左手持培养皿并将皿盖在火焰旁打开，迅速倒入培养基15ml,加盖后轻轻摇动培养皿，然后平置于桌血上，待凝后即为平板。3.采集微生物左手持试管，用右手手掌边缘及小指拔出试管塞，将棉签浸入无菌水浸湿，在选取的地点擦拭。左手持培养皿在火焰附近打开，用棉签在平板上涂抹。完毕后平置于

4、桌面。空气中6套（3套5分钟，3套10分钟）；桌面上3套；洗手前3套，洗手后3套；自选3套（本组选十元纸币）。【实验结果】表格一:【课后思考题】1.思考一：列举2・3类微生物，说明它们在本实验条件下（肉膏蛋白陈琼脂平板，37°C）不能生长。因为牛肉膏蛋白腺培养基是用来培养细菌的,故不能培养真菌/列如:霉菌，酵母菌•其次实验是在37摄氏度进行，可能有些微生物不适合在此温度下培养。2•思考二：比较各种来源的样品，哪一种菌落数和菌落类型最多？为什么？洗手后的菌落数最多，洗手后菌种减少，但抑制作用也减少，所以数量多，而其他取样

5、的培养基虽然菌种数目多，但是各种菌间的抑制作用较强，限制了菌株的生长。菌落类型为洗手前最多。因为手接触了很多细菌或霉菌，包括空气中的，都可通过手的接触进入培养基。3.思考三：比较洗手前后菌落数的变化，谈谈你的体会。洗手后仍有少量细菌生长，你认为是什么原因？洗手前菌落数比洗手后菌落数少，但是菌种数目多。洗手前，多数菌落为霉菌，洗手后，大多数为小型细菌菌落，而且数量较多。猜测原因为，洗手前的平板，霉菌牛长可能抑制了细菌牛长，因而菌落数较少；洗手后，霉菌被除去，细菌生长不受影响，故细菌菌落较多。3.思考四：完成本实验后，你是

6、否已体会到我们生活在微生物的包围中？你如何体会“微生物既是我们的朋友又是我们的敌人”？自然界中菌类数量众多，种类繁多。有些对人类有益，例如根瘤菌,圆褐固氮菌都是将氮元素活化，让植物來利用的微生物。在生物工程方面,用酵母菌酿酒，用乳酸菌制酸奶，用毛霉制腐乳。还可以制造生物杀虫剂，如苏方金杆菌，日本金龟子芽胞杆菌，对人畜无害，是一种比较绿色的杀虫剂。当双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌在肠道内生长、繁殖，将阻止外面的病原体入侵肠道，构筑成一个生物屏障，对人的健康有益。然而，有一些微生物属于动植物细菌和病毒，给农牧业生产带來危害，如

7、烟草花叶病毒，禽流感病毒。还有结核杆菌会引发结核病，流行感冒病毒会引发感冒等等。4.思考五：培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是否为无菌的？因为在配制培养基的过程中沾染很多微生物，如果不立即灭菌，那么培养基冷凝后接种了微生物，会影响微生物的生长，并且是培养的微生物不纯。将灭菌后的培养基冷凝后放入恒温箱中培养，如果若干天后培养基上没有菌落出现，则断定培养基为无菌的。6•思考六：在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题，为什么？PH值应调节为7.0-7.2Z间，一般培养基可采用120°C高压蒸汽灭菌的

8、方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。将全部培养基恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。培养