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时间:2019-10-09
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1、GoodmorningHistologyandEmbryology组织与胚胎学DepartmentofHistologyandembryologyByWangYanrong(王燕蓉教授)组织学研究内容和意义组织学研究方法和技术组织学的学习方法第一章组织学绪论(Introduction)一、概述1、组织学与胚胎学的研究内容组织学:研究机体微细结构和相关功能。细胞:是人体的形态结构、生理功能、和生长发育的基本单位。组织:细胞群+细胞外基质(extracellularmatrix)四大基本组织(basictissue)上皮组织(epithelialtissue)结缔组织(connec
2、tivetissue)肌组织(musculartissue)神经组织(nervetissue)OrganPrimarytissueBasictissueOrganhistology器官:各种基本组织按一定的规律有机地结合在一起System:功能相关的器官组成系统,完成连续的生理过程.epithelialtissueconnectivetissuemuscletissuenervoustissueTissueCellintercellularsubstancePrimarytissueEpithelialtissueConnectivetissueMuscletissueNerv
3、oustissue胚胎学:研究人体发生、发育过程及相关规律的科学2、组织胚胎学与其他学科间的关系生理学病理学妇产科学外科学显微镜的发明于16世纪末的荷兰。1665年Hooke提出“细胞”,开创了用显微镜研究生物构造的先河。二、组织学的研究方法和技术透射电子显微镜(ElectronMicroscopeEM)最大分辩率为0.2nm.超微结构显微镜观察常用的长度计量单位1微米(micrometerμm)=1/1000毫米(mm)1纳米(nanometernm)=1/1000微米(μm)光学显微镜(LightMicroscope)最大分辨率为0.2μm.(LightMicroscope
4、,LM)光镜结构(一)普通光镜组织标本的制备方法1.石蜡切片术(paraffinsectioning)取材、固定→脱水、包埋→切片、染色→封片甲醛酒精复合固定剂酒精石蜡5-10μmHE特殊染色目的:使组织切片着色,便于观察.常用HE染色苏木精(hematoxylin):碱性染料染细胞核及细胞质内核糖体成紫兰色。伊红(eosin):酸性染料染细胞质及胶原纤维成粉红色染色染色嗜碱性(basophilia):易被碱性染料着色嗜酸性(asidophilia):易被酸性染料着色中性(neutrophilia):与两种染料的亲和力都不强。亲银性,嗜银性:银染Silverstaining异染
5、性:甲苯氨蓝染色2、其他组织切片的制作方法冰冻切片::可保存蛋白质的结构和性质取材→速冻→冰冻切片→染色→封固铺片:疏松CT或肠系膜等涂片:体液标本:如血液、精液、脑脊液等磨片:如牙、骨等坚硬组织可磨成薄片骨磨片bonegroundsectionsilverstain血涂片bloodsmearWrightstaining铺片Stretchedpreparation(二)光学显微镜术1.普通光学显微镜2、特殊显微镜(1)荧光显微镜:(fluorescencemicroscope)紫外光激发标本中的荧光物质产生各种颜色的荧光(2)相差显微镜(phasecontrastmicrosc
6、ope)观察体外培养的活细胞形态结构光→细胞内不同折射率结构时,速度和方向发生变化→特殊物镜转化为光密度差异.普通光镜图像相差显微镜图像(3)激光共聚焦显微镜:(Confocallaserscanningmicroscope)组成:激光光源共聚焦扫描系统电子光学系统计算机图象分析系统.对细胞非侵入式光学断层扫描成像(二维或三维分析).Practicalarrangementofaconfocalmicroscope.Lightfromalasersourcehitsthespecimenandisreflected.Abeamsplitterdirectsthereflecte
7、dlighttoapinholeandadetector.人脐静脉内皮细胞内Ca2+分布1932年Ruska;Knoll发明了电子显微镜(electronmicroscope),使观察工具的分辨率由0.2µm提高到0.2nm.1.透射电镜-transmissionelectronmicroscopeTEM分辩率为0.2nm固定——→包埋——→切片——→染色戊二醛、树脂包埋超薄切片醋酸铀锇酸双重固定(50—80nm厚)柠檬酸铅2.扫描电镜(scanningelectronmicroscopeS
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