沙门氏菌的多克隆抗体制备及纯化

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1、沙门氏菌的多克隆抗体制备及纯化摘耍：沙门氏菌是一•种常见的重耍人兽共患病原菌，广泛分布于自然界，极易污染食品、水源及备产品，会引起各种动物与人类多种疾病。沙门氏菌病(salmonellosis)^由沙门氏菌属中的-•种和儿种致病性沙门氏菌引起人和多种动物感染的急性和慢性疾病的总称，世界上已发现沙门氏菌有二千多个血淸型。传统的细菌检测方法包括细菌形态观察、生化鉴定和血淸学鉴定。木实验利用免疫法，制备抗沙门氏菌的多克隆抗体，再利用硫酸徴沉淀法，进行抗体的初步提纯。使川了两种不同的沉淀步骤，去除血清中的杂蛋口，一种是从高浓度到低浓度，另一种则相反，以了解不同步

2、骤对抗体活性的影响，和纯化效果，以及抗体损失的情况。关键词：多克隆抗体制备；抗体纯化；细菌检测；沙门氏菌PrepareandPurifytheSalmonellaMulti-cloneAntibodyYINZhi-liangCollegeofLifeScienceFacultyadviserXIEZhen-wenLIURong-zhenAbstract：Thetraditionalbacteriumexaminationmethodsincludethebacteriumshapeobservation,thebiochemistryappraisala

3、ndtheserologyappraisal.TheimmunizationwasusedtopreparetheSalmonellamulti-cloneantibody,andthenprecipitatedbyammoniumsulfate.Theantibodywaspurifiedprimarily.Twodifferentprecipitationprocesseswereadoptedinordertoeliminatethemixedproteinintheserum,onewasfromthehighconcentrationammon

4、iumsulfatetothelowtoprecipitatetheantibody,andtheotherwasopposite・Thepuiposewastofindouttheinfluenceontheantibodyactive,thepurificationeffect,andthesituationoftheantibodylosing・Keywords：Salmonella；multi-cloneantibody；bacteriumexamination；antibodypurify1前言沙门氏菌广泛分布于口然界，极易污染食品、水源及畜产

5、品，是--种常见的重要人兽共患病原菌⑴，山沙门氏菌属中的一种和几种致病性沙门氏菌引起人和多种动物感染的急性和慢性疾病总称为沙门氏菌病(Salmonellosis，临床上多以败血症和肠炎为特征。口1885年Salmon和Smith分离到猪霍乱沙门氏菌以来,对沙门氏菌病的研究历史己有百余年。迄今为止，世界上已发现沙门氏菌有2,000血•清型⑵，在我国发现的血清型近200个。沙门氏菌是一种常见的重要人兽共患病原菌，不仅引起各种动物的沙门氏菌病，而且与人类多种疾病有关，据WHO统计，在世界各地由沙门氏菌引起的食物中毒病例在食物中毒中居于首位或第二位小，约占细菌性

6、食物中毒事件总量的42.6%~60%⑸，在我国细菌性食物中毒中70^80%是由沙门氏菌引起的叫在我国，沙门氏菌感染率很高，常常经污染猪肉、鸡肉、鸡蛋及其它畜产品，引起人的沙门氏菌感染，导致人类疾病。国内外的研究表明全世界人沙门氏菌感染有逐渐上升的趋势，由沙门氏菌引起的医院内感染和食物中毒不断增多⑹’⑺。传统的细菌检测方法包括生化鉴定和血清学鉴定，而忖前包括我国在内的大多数国家都使用这两种方法，原因是这两种方法的检测成本低，技术成熟。生化鉴定就是利用细菌在进化的过程中形成的各界的新陈代谢途经，对底物的利用各不相同，利用这样的方法來进行鉴定。而血清学鉴定就是

7、利用抗原抗体特界性结合，这种结合的速度非常快，通常只需几秒到十几秒内就能完成，而且特异性也非常好，很少会出现假阴。因此利用血清学鉴定细菌，非常迅速而准确，对于快速鉴定细菌可以发挥很人的功效，抗体可以分为多克隆抗体和单克隆抗体，这两种抗体都有其优势，但也有很明显的缺点，多克隆抗体制备简单，单克隆抗体没有交叉反应。但两种抗体都有敏感性好，特异性高，检测方便等特点。而沙门氏菌由于有多种血清型，要进行分类学、生化学的复杂性以及血清学的多样性使其常规检验程序十分繁琐费时。虽然各菌株Z问都具有籍以区别的差异。但在实际操作中分离得到的不同属的菌株Z间有时仅存在极小的差

8、别，要区分这此菌•株，常需人量的工作。沙门氏菌单克隆抗体的研究被认为是简化这种工