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时间:2019-09-15
《大豆查尔酮异构酶GmCHI4A和GmCHI4B基因的克隆及功能验证》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、:S56511018分类号.单位代码:3研究生学号:2015862007密级:公开吉林大学硕士学位论文学术学位()大豆查尔酮异构酶GmOZCHI4A和GmCHI4BCloningandFunctionalVerificationofChalconeIsomeraseGeneGmCHI4AandGmCHI4BinSoybean作者姓名:何则铭专业:作物学研究方向:作物分子育种指导教师:王英副教授培养单位:植物科学学院2018年6月大豆查尔酮异构酶GmCHI4A和
2、GmCHI4B基因的克隆及功能验证CloningandFunctionalVerificationofChalconeIsomeraseGeneGmCHI4AandGmCHI4BinSoybean作者姓名:何则铭专业名称:作物指导教师:王英副教授学位类别:农学硕士答辩日期:2018年5月29日未经本论文作者的书面授权,依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人,均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用(但纯学术性使用不在此限)。否则,应承担侵权的法律
3、责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交学位论文,是本人在指导教师的指导下,独立进行研宄工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:年月6曰6中文摘要大豆查尔酮异构酶GmCHI4A和GmCHI4B基因的克隆及功能验证大豆是我国重要的经济作物,其不仅具有丰富的蛋白质和油脂,还富含维生素,异黄酮等有益身体
4、健康的微量物质,具有极高的营养价值和经济价值。然而,干旱、病害、低温、土地盐碱化等不良环境因素可严重影响大豆的正常生长发育,进而影响产量。研究表明,CHI查尔酮异构酶在植物应对生物非生物胁迫,提高植物抗逆性中起着重要作用。本实验以大豆Williams82为材料,克隆了查尔酮异构酶基因GmCHI4A和GmCHI4B,并对其进行功能验证,主要研究结果如下:1.利用RT-PCR方法从大豆品种Williams82中克隆了GmCHI4A和GmCHI4B基因。GmCHI4A和GmCHI4B的ORF全长均为630bp,编码209个氨基酸残基,预测相对
5、分子质量分别为23.5KDa和25.56KDa。预测编码的蛋白定位于细胞核中。氨基酸序列比对和系统进化树分析表明,GmCHI4A和GmCHI4B基因属于IV型查尔酮异构酶基因。2.SDS-PAGE电泳检测到GmCHI4A和GmCHI4B基因均可在原核系统中高效表达。3.利用荧光定量PCR技术对GmCHI4A和GmCHI4B基因表达进行了分析,结果表明,GmCHI4A和GmCHI4B在大豆根、茎、叶、胚都有表达,不具有组织特异性,且二者均在根部表达量最高。4.利用发根农杆菌将GmCHI4A和GmCHI4B转化到大豆子叶节中,诱导产生发状根
6、,对转基因大豆发状根进行NaCl盐胁(浓度)迫处理,鉴定GmCHI4A和GmCHI4B的抗盐性。结果表明,与对照相比,转GmCHI4A和GmCHI4B的大豆发状根的耐盐性均显著提高,说明GmCHI4A和GmCHI4B能提高转基因大豆根系的耐盐性。5.转GmCHI4A和GmCHI4B基因的大豆发状根中,GmTIP1:1,GmSOD1,GmSOS1的表达量显著上升,GmTIP1:3,GmCAT1,GmPOD的表达量下降。I6.与对照相比,转GmCHI4A和GmCHI4B基因的大豆发状根中,异黄酮总量含量有所增加。关键字:大豆;发根农杆菌;功
7、能鉴定;抗盐性;CHI查尔酮异构酶IIAbstractCloningandFunctionalVerificationofChalconeIsomeraseGeneGmCHI4AandGmCHI4BinSoybeanSoybeanisanimportantcashcropinChina.Itisnotonlyrichinproteinandoil,butalsorichinvitamins,isoflavonesandothertracesubstancesthataregoodforhealth.Ithashighnutritiona
8、lvalueandeconomicvalue.However,drought,disease,lowtemperature,landsalinizationandotheradverseenvironmen
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