卵巢癌患者与健康志愿者脂联素水平检测及脂联素对卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控作用研究

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1、分类号：R737.31单位代码：10159密级：公开学号：201010137博士学位论文中文题目：卵巢癌患者与健康志愿者脂联素水平检测及脂联素对卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控作用研究英文题目：DetectionofadiponectinlevelinOvarianCancerpatientsandhealthyvolunteersandregulationroleofadiponectinonproliferationandapoptosisofovariancancercell论文作者：冯跃琴指导教师：王学梅教授学科专业：影像医学与核医学完成时间：2018年10月中国医科大学博士学位论文卵巢癌患

2、者与健康志愿者脂联素水平检测及脂联素对卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控作用研究DetectionofadiponectinlevelinOvarianCancerpatientsandhealthyvolunteersandregulationroleofadiponectinonproliferationandapoptosisofovariancancercell论文作者冯跃琴指导教师王学梅教授申请学位医学博士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科影像医学与核医学研究方向卵巢癌的机理及治疗论文起止时间2013年9月—2018年10月论文完成时间2018年10月中国医科大学（辽宁）2018年

3、10月I中国医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研宄工作及取得的研究成果，论文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：２年／月介日４／中国医科大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅

4、和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内＂〃划Ｖ）论文作者签名：指导教师签名：１１為日期：加以年＂月知曰日期：％／押＂月％日ＩＩ中国医科大学博士学位论文摘要目的：卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，由于其发病和进展隐匿，早期多无明显症状，就诊时70%已属晚期，病死率居于前列。鉴于卵巢癌的高发病率和致死率，以及在流行病学上脂联素与癌症的密切关系，本课题旨在探索脂联素对卵巢癌细胞的增殖及凋亡有无影响以及可能的作用机制。

5、方法：一、卵巢癌患者与健康志愿者脂联素水平检测1．卵巢癌患者与健康志愿者脂联素水平检测收集2013年1月至2013年12月间就诊于中国医科大学第一附属医院的卵巢癌患者的血清标本46份及腹水标本25份，标本满足如下条件：(a)患者均为经过病理学确诊的卵巢癌患者，(b)以FIGO国际分期法分期明确的患者，（c）无高血压、糖尿病等慢性病史。2．收集正常对照血清标本17份，来源于2013年1月-2013年12月间于中国医科大学第一附属医院体检的志愿者。志愿者满足如下条件：体检中未发现肿瘤及妇科疾病、无高血压、糖尿病等慢性病史的健康女性。3．双抗体夹心ELISA法检测血清及腹水标本的脂联素水平。二、脂联

6、素对卵巢癌细胞增殖的影响1．用Real-timePCR法及Westernblotting法检测卵巢癌SKOV3、Caov3细胞脂联素受体1的表达水平。2．MTT比色法观察卵巢癌SKOV3、Caov3细胞在不同浓度（0，5，10，50，100，200ng/ml）外源性脂联素作用48小时后细胞的增殖情况。同法观察以100ng/ml的外源性脂联素刺激后不同时间点（24，48，72小时）细胞的增殖情况。3．采用Real-timePCR法及WesternBlotting法观察卵巢癌SKOV3、Caov3细胞在外源性脂联素（100ng/ml）刺激48小时后细胞周期蛋白cyclinB的表达水平。4．采用We

7、sternBlotting法分析比较三个组（未处理组、H2O2（50µM）处理组以及H2O2（50µM）+脂联素处理组）的Caov3细胞的凋亡相关蛋白caspase-3、Bax的蛋白表达水平；同法比较SKOV3细胞三个亚组的凋亡相关蛋白caspase-3、Bax的蛋白表达水平。三、脂联素对分子Akt、ERK磷酸化的影响以100ng/ml的脂联素刺激人卵巢癌细胞株Caov3和SKOV3细胞后，在不同