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1、脂联素对TNF论文刘金波，邓华聪，葛倩，李丙蓉，郑宏庭，兰丽珍【关键词】脂联素；肿瘤坏死因子α；内皮,血管/细胞学；动脉硬化InfluenceofadiponectinonvascularinflammatoryreactionmediatedbyTNFαLIUJinBo,DENGHuaCong,GEQian,LIBingRong,ZHENGHongTing,LANLiZhenDepartmentofEndocrinology,FirstAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chon
2、gqing400016,China【Abstract】AIM:ToinvestigatetheinfluenceofadiponectinontheinflammatoryreactioninvascularendothelialcellsinducedbyTNFα.METHODS:Humanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)algroup,TNFαstimulationgroupandadiponectinandTNFαassociatedstimulationgroup.HUVECanrebin
3、antadiponectinfor30minto16h,thenexposedtohumanrebinantTNFαfor6to12h(adiponectinandTNFαassociatedstimulationgroup),.freelulationgroupintheexpressionsofNO,iNOS,ET1andMCP1.Theinteractionbetatedbychemicalmethod,radioimmunoassayandELISA.RESULTS:TheexpressionsofNO,iNOS,ET1andM
4、CP1ulatedbyTNFαfor6to12h(607.7±7.6,42.2±2.2,199.3±11.9,167.7±15.9vs543.5±2.2,23.8±2.0,148.4±5.3,128.0±8.4;P0.05).paredulationgroup,theexpressionsofNO,iNOS,ET1andMCP1inadiponectinandTNFαassociatedstimulationgroupodulateendothelialinflammatoryresponsethrougheffectingtheexp
5、ressionsofsomeinflammatoryfactors,andadiponectinhasprotectiveactionsagainsttheinitiationandprogressionofatherosclerosis.【Keyornecrosisfactoralpha;endothelium,vascular/cytology;arteriosclerosis【摘要】目的：探讨脂联素对肿瘤坏死因子（TNFα）引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法：体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）.随机分为对照组，TNFα刺激
6、组和脂联素+TNFα刺激组.HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNFα刺激与单纯TNFα刺激做对照，分别采用化学法.freelanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC）购自中科院细胞库；重组人脂联素购自美国R＆D公司；重组人肿瘤坏死因子购自北京宝赛生物技术有限公司；NO检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；内皮素放免试剂盒购于北京东亚免疫研究所；人MCP1ELISA试剂盒购自美国BIOSOURCE公司；722光栅分光光度计，重庆川仪九厂；自动放免仪中国科大中佳公司；BioTEKELX800型酶标
7、仪.1.2方法1.2.1细胞培养人脐静脉内皮细胞株培养于含100mL/L小牛血清的RPMI1640培养液中，置于37℃,50mL/L的CO2培养箱中培养，每2～3d用2.5g/L胰酶消化传代.生长至85%融合时接种于96孔细胞培养板，接种细胞密度为1×105个/mL，待细胞贴壁后，改用无血清RPMI1640培养液继续培养24h，弃去旧的培养液后用于下一步实验.1.2.2脂联素对内皮细胞表达NO,iNOS,ET1的影响①实验分组：按照随机化分组的原则，每组重复5孔.对照组；TNFα刺激组：根据预实验结果确定TNFα终浓度10μg/L;TN
8、Fα+脂联素刺激组：根据预实验结果确定脂联素终浓度为10mg/L;10mg/L脂联素作用0.5h后加入10μg/LTNFα.②NO测定：上述干预因素作用6h后取细胞培养上清液检测，具体操作步骤严格按试剂盒说
