附子中3种双酯型生物碱含量测定方法的建立

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1、2附子研究概况附子为亚门毛萇科(Ranunculaccac)植物乌头(AconitumcarmichacliDebx.)侧根(子根)的加工甜,其性大热、辛、甘,归心、肾,生甜极毒。中医认为附子具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛、逐风通痹、温阳行水等功效。附子始载于《神农本草经》,主风寒咳逆邪气,温中,金疮,破症坚积聚,血痕,寒湿,拘挛膝痛,不能行步⑴。2.1附子化学成分研究国内外学者对附子化学成分的研究表明,附子的化学成分分为生物碱类物质、脂类物质和多糖类物质三大类。其中生物碱类物质为其主要成分,包括脂溶性生物碱:乌头碱(aconitine),中乌头碱(新乌头

2、碱mesaconitine),次乌头碱(卜乌头碱、海帕乌头碱hypaconitine),塔拉乌头胺(talatisamine),和乌胺(higeramine)棍掌碱氯化物(coryneinechloride),异飞燕草碱(isodelphinine),苯甲酰中乌头碱(benzoylmesaconitine),新乌宁碱(neoline),北乌头碱(beiwutine),多根乌头碱(karakoline),去氧乌头碱(deoxyaconitine),准葛尔乌头碱(songorine);水溶性生物碱:江油乌头碱(jiangyouaconitine),新江油乌头碱(

3、neojiangyouaconitine)>尿卩密唳(Urac订)⑶、附子亭碱(fuzitine)、消旋去甲基衡州乌药碱(demethylcoclaurine)'、、附子宁碱(fUziline)、去甲猪毛菜碱(salsolinol)⑸等。其中双酯型生物碱乌头碱(aconitine),中乌头碱(mesaconitine),次乌头碱(hypaconitine)为其主要成分,约占0.4%-0.8%,易溶于氯仿、苯、无水乙醇和乙醯,难溶于水,微溶于石油瞇,既是附子的药效成分,又是毒性成分。三者易水解成为毒性较小的单酯型生物碱:苯甲酰乌头碱(乌头次碱Benzoylac

4、onine)、苯甲酰中乌头碱(Banzoylmesaconine)、苯甲酰次乌头碱(Benzoylhypaconine)[6其毒性仅为双酯型生物碱的1/1000。单酯型生物碱如果进一步水解则变为毒性更小或无毒的醇胺类牛物碱:乌头胺(乌头原碱Aconine)>中乌头胺(Mesaconine)>次乌头胺(Hypaco-nine)o其毒性仅为乌头碱的1/2000左右⑺。此外,附子还含有棉子油、蒐麻油、附子脂酸等脂类物质和乌头多糖。2.2附子主要药理作用2.2.1对心血管系统的作用研究表明,附子对心血管系统的用主要体现在以下几个方面。首先是强心作用,附子的强心机理

5、是附子中的强心成分致B受体兴奋,释放儿茶酚产生强心作用。已经被证明的具有强心作用的成分有去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱、氯化甲基多巴胺、尿喀噪以及附子昔,其中去甲乌药碱活性很强,对体内心脏、离体心脏和功能衰竭的心脏均有较强的强心作用,在稀释至1(T时仍表现岀强心作用。秦永刚屈等用离体蛙心,对不同蒸煮时间的附子进行了强心作用及心脏毒性的初步实验观察,实验结果表明,蒸煮8h、10h、12h的附子具有强的止性肌力作用,且心脏毒性显著降低。张志仁⑼等的研究表明附子炮制前后有效部位对正常及心衰大鼠血流动力学作用趋势一致,且对心衰大鼠血流动力学作用较正常大鼠血流动力学作用显著

6、。第二是抗心肌缺血缺氧的作用。附子中的生物碱具有扩张冠状血管和四肢血管的作用,可抗急性心肌缺血及常压下缺氧"°)。第三是增强心率、对抗缓慢型心律失常。附子中水溶性成分能对抗乌头类生物碱所诱发的心律失常,但是对多巴因、三氯甲烷所引起的心律失常无效,具有特异性。附子注射液可对抗垂体后叶素所致的各种不同类型的心律失常3。第四是对血压的彫响。附子中的水溶性成分对血压的影响具有双重性,去甲乌药碱可以降血压,而氯化甲基多巴胺和去甲猪毛菜碱具有升压的作用。第五是抗休克作用。附子煎剂及复方可减缓血压下降、心率减慢等,能显著延长休克动物生存时间肠。2.2.2抗炎镇痛作用大鼠足

7、踝肿胀实验证明,附子具有显著的抗炎和对外周性疼痛的镇痛作用。其抗炎镇痛机理,学术界的看法不一,除了已经被证明的具有较好抗炎作用的乌头类生物碱丽和一些水溶性的成分外,还有一部分学者认为附子的抗炎镇痛与垂体-肾上腺皮质系统有关网。因此,附子的抗炎及镇痛的作用机理和有效活性成分有待进一步研究探讨丽。2.2.3免疫系统作用附子对免疫系统的作用表现为增强脾细胞的增值反应,增强巨噬细胞表面3抗原表达,增强红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环形成率,产生抗体,提高免疫能力。马健冏等研究发现乌头碱可增强巨噬细胞表而3抗原表达,提高抗原能力,从而增强机体免疫应答反应。此外,阮

8、期平⑴等研究还发现附子中有两种糖复合物,同样具有抗癌

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